[發明專利]硅膠柱層析分離中藥生物堿的方法

無效

• 申請號: 201010588418.0
• 申請日: 2010-12-15
• 公開（公告）號: CN102093433A
• 公開（公告）日: 2011-06-15
• 發明（設計）人: 譚湘陵;羌利民
• 申請（專利權）人: 南通遠大生物科技發展有限公司;譚湘陵
• 主分類號: C07G5/00
• 分類號: C07G5/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域：

本發明涉及一種從中藥中提取生物堿的方法，尤其是涉及一種利用硅膠柱層析從中藥中提取生物堿的方法。

背景技術：

生物堿是廣泛存在于自然界的一類含氮的有機化合物，大多數具有較復雜的氮雜環結構，呈堿性。生物堿的發現始于19世紀初，是人們研究的最多而且最早的一類天然的有機化合物。目前已發現的生物堿大約6000余種，并且仍以每年約100多種的速度遞增。因為大多數生物堿都具有抗癌、抗腫瘤、抗炎、抗病毒以及抗血小板凝集、抗心律失常以及抗高血壓等心血管疾病的作用，因此，它在衛生、醫藥等方面有著巨大的應用潛力。由于大多數生物堿的藥理作用尚有待進一步研究，這就需要從大量含有生物堿的藥用植物中提取、分離、純化生物堿。如何運用現代高效的分離手段，簡便而高效的分離，是當前生物堿研究的一個重要方面。

按照生物堿的基本結構，已可分為幾十種類型。大多數生物堿幾乎不溶或難溶于水，能溶于氯仿、乙醚、酒精、丙酮、苯等有機溶劑，但生物堿與稀酸作用生成鹽類后，可溶于水溶液中。絕大多數生物堿在常壓時均無揮發性，一般性質較穩定，分離純化過程不需要特殊環境，在貯存上除避光外，不需其他特殊條件。許多藥用植物中富含生物堿，是中藥有效成份的組成部分。生物堿有效成分的分離與純化是中藥開發的難點與關鍵，新技術的研究與開發能大大提高中藥化學成分的收率與質量，節約大量的時間與能源。

發明內容：

本發明為了解決現有技術對中藥中生物堿提取成本較高、操作復雜、提純率低、不利于工業化生產的問題而提供了一種硅膠柱層析分離中藥生物堿的方法。

為了解決以上技術問題，本發明的技術方案是：一種硅膠柱層析分離中藥生物堿的方法，具體工藝步驟如下：

(1).原料預處理

將中藥材洗凈，60℃下烘8h至恒重，用粉碎機粉碎后過60目篩，得中藥粉末備用；

(2).溶解

按照HCl和水1∶10的比例加入濃度為0.04％的HCl，充分攪拌，微波爐處理2分鐘，用離心機6000r/min離心20min，取上清液；取上清液后把沉淀按照上述的1和2步驟再重復一次；合并兩次上清液，用10％氨水調pH值為10；

(3).氯仿萃取

加入上清液1/5體積的氯仿萃取，同樣氯仿萃取3次，合并氯仿層，利用旋轉蒸發儀減壓蒸干；

(4).層析

根據層析柱的體積，用300-400目硅膠干法填充至層析柱3/4處，用3倍層析柱體積的氯仿過柱；將待純化的液體加到層析柱的頂端，加入量不超過柱體積的1/10，打開柱下端，使液體浸入硅膠中；以甲醇和氯仿配比為1∶1的洗脫劑洗脫，從第二個柱體流出的液體開始收集，一直收集到第六個柱體流出液為止；

(5).干燥

將收集液用旋轉蒸發儀減壓蒸干。

本發明避免了使用索氏提取裝置等復雜耗時的儀器設備，具有效率高，較為簡便等特征，硅膠層析具有成本低廉，重復性高，操作方便等優點。

具體實施方式：

本發明的具體工藝步驟如下：

1.原料預處理

將中藥材(如荷葉、黃連、延胡索、杜仲等，根據不同需要分別提取)洗凈，60℃下烘8h至恒重(恒重：延長干燥時間藥材的重量并不發生變化)。用粉碎機粉碎后過60目篩，得中藥粉末備用。

2.溶解

按照HCl和水1∶10(HCl∶水＝1∶10)的比例加入濃度為0.04％的HCl，充分攪拌；WD900B型微波爐處理2分鐘，用離心機6000r/min離心20min，取上清液；取上清液后把沉淀按照上述的1和2步驟再重復一次。合并兩次上清液(將2次離心的上清液合并)，用10％氨水調pH值為10。

3、氯仿萃取

加入1/5體積(步驟2中合并后的上清液的1/5)的氯仿萃取(氯仿萃取就是一種萃取方法)，同樣氯仿萃取3次，合并氯仿層，利用旋轉蒸發儀減壓蒸干。無水乙醇溶解沉淀，待柱層析純化。

4、層析