[發(fā)明專利]一種魚類組織快速切片方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010585906.6
• 申請日: 2010-12-13
• 公開（公告）號: CN102062709A
• 公開（公告）日: 2011-05-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 葉元土;蔡春芳;殷永風(fēng);張寶彤;向朝林
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/30
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 陶海鋒

1.?一種魚類組織快速切片方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）使用固定液將魚組織塊固定4～6小時，然后將固定后的魚組織塊修切成長2mm×寬2mm×高1～2?mm大小的切片組織塊，然后使用蒸餾水按照體積比1:1稀釋的雞蛋清浸泡10～20秒，進(jìn)行冰凍切片，然后進(jìn)行貼片；

2）貼片后常溫下放置3～5min，然后進(jìn)行染色，染色的過程具體為：將切片浸在蘇木精溶液中80s，生理鹽水浸洗3s，浸入酸液中3～5?s，生理鹽水浸洗3s，堿液中10～15?s，伊紅溶液中1～3s，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)95%的乙醇水溶液浸泡兩次，每次5?s，用100%乙醇浸泡兩次，每次5?s，然后晾干，用中性樹膠和蓋玻片封片后即可顯微鏡下觀察；其中，酸液：1000ml水中加入5ml濃鹽酸混勻，所述濃鹽酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)38%；堿液：1000ml水中加入5ml濃氨水混勻，所述濃氨水質(zhì)量分?jǐn)?shù)28%；上述生理鹽水為魚用生理鹽水，按照質(zhì)量百分比，所述魚用生理鹽水的配方為：NaCl?0.75%，KCl?0.01%，CaCl₂?0.01%，NaHCO₃?0.02%，余量為水。

2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述切片方法，其特征在于，步驟1）中，所述魚組織塊的尺寸為長5～8mm×寬5～8mm×高3?mm。

3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述切片方法，其特征在于，步驟1）中，將魚組織塊固定前，先將魚組織塊在魚用生理鹽水中洗凈，然后用吸水紙吸干表面水分。

4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述切片方法，其特征在于，步驟1）中，所述固定液為鮑音液。

5.?根據(jù)權(quán)利要求1所述切片方法，其特征在于，步驟1）所述冰凍切片步驟中，樣品臺溫度設(shè)定為-25℃、刀片溫度設(shè)定為-20℃；將切片組織塊快速貼在樣品臺上進(jìn)行切片。

6.?根據(jù)權(quán)利要求5所述切片方法，其特征在于，將面積最大的一面貼向樣品臺，3～5min后即可進(jìn)行切片；切片厚度要求為：腸道為4～5μm，肝胰臟為2～5μm，其他組織5～8μm。