[發(fā)明專利]一種大豆抗原蛋白過敏細(xì)胞模型及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010577271.5
• 申請日: 2010-12-07
• 公開（公告）號(hào): CN102120984A
• 公開（公告）日: 2011-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬曦;李德發(fā);賀平麗;譙仕彥
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N5/071
• 分類號(hào): C12N5/071;C12Q1/02
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

1.一種制備大豆抗原蛋白過敏細(xì)胞模型的方法，包括如下步驟：

將肥大細(xì)胞與大豆抗原蛋白特異性IgE抗體共孵育，孵育后的細(xì)胞，即為大豆抗原蛋白過敏細(xì)胞模型。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于：

所述大豆抗原蛋白特異性IgE抗體通過如下方法制備：將大豆抗原蛋白免疫動(dòng)物，得到抗血清，即得到大豆抗原蛋白特異性IgE抗體；

所述大豆抗原蛋白為大豆總抗原蛋白、大豆胰蛋白酶抑制因子、β-伴大豆球蛋白和/或大豆球蛋白。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述方法，其特征在于：

所述大豆抗原蛋白過敏細(xì)胞模型為如下1)-4)中任一所述過敏細(xì)胞模型：

1)為通過如下方法制備：將肥大細(xì)胞和大豆胰蛋白酶抑制因子抗血清共孵育，得到孵育后的細(xì)胞，即為大豆胰蛋白酶抑制因子過敏細(xì)胞模型；

2)為通過如下方法制備：將肥大細(xì)胞和大豆總抗原蛋白抗血清共孵育，得到孵育后的細(xì)胞，即為大豆總抗原蛋白過敏細(xì)胞模型；

3)為通過如下方法制備：將肥大細(xì)胞和β-伴大豆球蛋白抗血清共孵育，得到孵育后的細(xì)胞，即為β-伴大豆球蛋白過敏細(xì)胞模型；

4)為通過如下方法制備：將肥大細(xì)胞和大豆球蛋白抗血清共孵育，得到孵育后的細(xì)胞，即為大豆球蛋白過敏細(xì)胞模型。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述方法，其特征在于：

所述大豆胰蛋白酶抑制因子抗血清通過如下方法制備：將大豆胰蛋白酶抑制因子免疫動(dòng)物，分離血清，即得到大豆胰蛋白酶抑制因子抗血清；

所述大豆總抗原蛋白抗血清通過如下方法制備：將大豆總抗原蛋白免疫動(dòng)物，分離血清，即得到大豆總抗原蛋白抗血清；

所述β-伴大豆球蛋白抗血清通過如下方法制備：將β-伴大豆球蛋白免疫動(dòng)物，分離血清，即得到β-伴大豆球蛋白抗血清；

所述大豆球蛋白抗血清通過如下方法制備：將大豆球蛋白免疫動(dòng)物，分離血清，即得到大豆球蛋白抗血清。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：

所述肥大細(xì)胞為RBL-2H3細(xì)胞；

所述動(dòng)物為大鼠。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：

所述共孵育的溫度為37℃，所述共孵育的時(shí)間為6小時(shí)-12小時(shí)，所述共孵育的時(shí)間具體為6小時(shí)、10小時(shí)或12小時(shí)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：

所述大豆胰蛋白酶抑制因子過敏細(xì)胞模型中，所述大豆胰蛋白酶抑制因子抗血清與所述肥大細(xì)胞的配比為10ul∶(0.5×10⁵-2×10⁵)個(gè)細(xì)胞，所述大豆胰蛋白酶抑制因子抗血清與所述肥大細(xì)胞的配比具體為10ul∶0.5×10⁵個(gè)細(xì)胞、10ul∶1×10⁵個(gè)細(xì)胞或10ul∶2×10⁵個(gè)細(xì)胞；

所述β-伴大豆球蛋白過敏細(xì)胞模型中，所述β-伴大豆球蛋白抗血清與所述肥大細(xì)胞的配比為10ul∶(0.5×10⁵-2×10⁵)個(gè)細(xì)胞，所述β-伴大豆球蛋白抗血清與所述肥大細(xì)胞的配比具體為10ul∶0.5×10⁵個(gè)細(xì)胞、10ul∶1×10⁵個(gè)細(xì)胞或10ul∶2×10⁵個(gè)細(xì)胞；

所述大豆總抗原蛋白過敏細(xì)胞模型中，所述大豆總抗原蛋白抗血清與所述肥大細(xì)胞的配比為10ul∶(0.5×10⁵-2×10⁵)個(gè)細(xì)胞，所述大豆總抗原蛋白抗血清與所述肥大細(xì)胞的配比具體為10ul∶0.5×10⁵個(gè)細(xì)胞、10ul∶1×10⁵個(gè)細(xì)胞或10ul∶2×10⁵個(gè)細(xì)胞；

所述大豆球蛋白過敏細(xì)胞模型中，所述大豆球蛋白抗血清與所述肥大細(xì)胞的配比為10ul∶(0.5×10⁵-2×10⁵)個(gè)細(xì)胞，所述大豆球蛋白抗血清與所述肥大細(xì)胞的配比具體為10ul∶0.5×10⁵個(gè)細(xì)胞、10ul∶1×10⁵個(gè)細(xì)胞或10ul∶2×10⁵個(gè)細(xì)胞。