[發明專利]用于鑒定短小乳桿菌的引物序列及其應用有效
| 申請號： | 201010574429.3 | 申請日： | 2010-12-06 |
| 公開（公告）號： | CN102094089A | 公開（公告）日： | 2011-06-15 |
| 發明（設計）人： | 張軍;田子罡;閆秩潔;王安如;張廣民 | 申請（專利權）人： | 北京大北農科技集團股份有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100080 北京市海淀區中*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 鑒定 短小 桿菌 引物 序列 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.用于鑒定短小乳桿菌的引物序列，其特征在于：正向引物具有序列表中SEQID?NO：1所述的堿基序列，反向引物具有序列表中SEQ?ID?NO：2所述的堿基序列。
2.如權1所述的引物序列在鑒定短小乳桿菌中的應用，其特征在于鑒定過程如下：(1)制備待測菌株的模板DNA；
(2)使用權1所述的引物對步驟(1)制備的模板DNA進行PCR擴增；
(3)利用瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產物，在200bp處產生特異性擴增條帶的菌株，則鑒定為短小乳桿菌。
3.如權2所述的引物序列在鑒定短小乳桿菌中的應用，其特征在于制備待測菌株的模板DNA過程如下：挑取短小乳桿菌的單菌落至50-100微升的超純水中，置于沸水中水浴5-15分鐘，于-80℃凍存15-40分鐘，至沸水中水浴5-15分鐘，4000-8000轉/分鐘離心5-10分鐘，取上清即得模板DNA。
4.如權2所述的引物序列在鑒定短小乳桿菌中的應用，其特征在于PCR擴增程序如下：95℃預變性5min，94℃變性30s，58℃退火30s，72℃延伸20s，進行30次循環，最后72℃延伸10min。
5.如權2所述的引物序列在鑒定短小乳桿菌中的應用，其特征在于電泳檢測PCR產物采用的為2％的瓊脂糖凝膠電泳，并用溴化乙錠染色。
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