[發明專利]測定血清中結合珠蛋白的方法及其檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201010562220.5
• 申請日: 2010-11-23
• 公開（公告）號: CN102128935A
• 公開（公告）日: 2011-07-20
• 發明（設計）人: 夏另朝;張筠
• 申請（專利權）人: 中生北控生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/536
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王加嶺;張慶敏

1.一種測定血清中結合珠蛋白的方法，其特征在于，將血清樣品與含有結合珠蛋白抗體的試劑反應，形成不溶性的免疫復合物，在抗體量一定的條件下，根據反應液前后吸光度的改變，測定血清樣品中結合珠蛋白的含量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，包括步驟：

1)將血清樣品與試劑R1按1-10∶250的體積比混合，讀出吸光度OD₁；

2)向上述混合液中按1-6∶1的體積比加入含有結合珠蛋白抗體的試劑R2，讀出吸光度OD₂；

3)采用全自動生化分析儀通過內置多點曲線擬合模式，自動計算出血清樣品中結合珠蛋白的含量；

其中，試劑R1含有：三羥甲基氨基甲烷0.01M-0.50M，聚乙二醇6000?1.0-10w/v％，吐溫20?0.1-1.0w/v％，氯化鈉0.5-5.0w/v％，pH值為6.0-9.0；試劑R2含有：三羥甲基氨基甲烷0.01M-0.50M，氯化鈉0.5-5.0w/v％，結合珠蛋白抗體5.0-50w/v％，pH值為6.0-9.0。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，試劑R1含有：三羥甲基氨基甲烷0.05M，聚乙二醇6000?2.5w/v％，吐溫20?0.2w/v％，氯化鈉0.85w/v％，pH值為8.0；試劑R2含有：三羥甲基氨基甲烷0.05M，氯化鈉0.85w/v％，結合珠蛋白抗體35w/v％，pH值為8.0。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，包括步驟：

1)將血清樣品及已知結合珠蛋白濃度C_校準的校準品分別與含有結合珠蛋白抗體的試劑R按0.1-10∶100的體積比混合，讀出各自吸光度A_校準、A_{人血清樣品}；

2)采用生化分析儀通過內置多點曲線或單點直線擬合模式，自動計算出血清樣品中結合珠蛋白的含量；

其中，試劑R含有：三羥甲基氨基甲烷0.01M-0.50M，聚乙二醇6000?1.0-10w/v％，吐溫20?0.1-1.0w/v％，氯化鈉0.5-5.0w/v％，結合珠蛋白抗體5.0-50w/v％，pH值為6.0-9.0。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述結合珠蛋白抗體為羊、兔、鼠或牛抗人結合珠蛋白抗體。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述結合珠蛋白抗體為羊抗人結合珠蛋白抗體。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述結合珠蛋白抗體為多克隆抗體或單克隆抗體。

8.根據權利要求2或4所述的方法，其特征在于，所述擬合模式包含Logit-Log(3p)、Logit-Log(4p)、Logit-Log(5p)、Spline、二次方程或Polygonal。

9.檢測血清中結合珠蛋白的試劑盒，其特征在于，其含有試劑R1和R2，其中試劑R1含有：三羥甲基氨基甲烷0.01M-0.50M，聚乙二醇6000?1.0-10w/v％，吐溫20?0.1-1.0w/v％，氯化鈉0.5-5.0w/v％，pH值為6.0-9.0；試劑R2含有：三羥甲基氨基甲烷0.01M-0.50M，氯化鈉0.5-5.0w/v％，結合珠蛋白抗體5.0-50w/v％，pH值為6.0-9.0。

10.根據權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，試劑R1含有：三羥甲基氨基甲烷0.05M，聚乙二醇6000?2.5w/v％，吐溫20?0.2w/v％，氯化鈉0.85w/v％，pH值為8.0；試劑R2含有：三羥甲基氨基甲烷0.05M，氯化鈉0.85w/v％，結合珠蛋白抗體35w/v％，pH值為8.0。