[發明專利]飛秒激光誘變米根霉選育富馬酸高產菌株的方法無效
| 申請號： | 201010551640.3 | 申請日： | 2010-11-22 |
| 公開（公告）號： | CN102061294A | 公開（公告）日： | 2011-05-18 |
| 發明（設計）人： | 聞建平;于守智 | 申請（專利權）人： | 天津大學 |
| 主分類號： | C12N13/00 | 分類號： | C12N13/00;C12N1/14;C12R1/845 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人： | 王麗 |
| 地址： | 300072 天*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 激光 誘變 米根霉 選育 富馬酸 高產 菌株 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種飛秒激光誘變米根霉選育富馬酸高產菌株的方法，其特征是步驟如下：
1)將米根霉(ATCC?20344)，在室溫下，制備104～106個孢子/mL的孢子懸液；
2)采用波長為800nm、重復頻率為76MHZ的飛秒激光，在照射功率為5～40mW、照射距離6em、激光束直徑6mm下，對該孢子懸液輻照5～30s；
3)涂布平板培養，搖瓶篩選高產菌株。
2.如權利要求1的方法，其特征是：所述的涂布平板培養的方法是：把經輻照處理的孢子懸液經無菌用去離子水稀釋100～10000倍后涂布于PDA培養基平板，35℃暗室培養至出現單菌落，再將每個單菌落分別挑取至一個PDA培養基平板中，用無菌去離子水洗下孢子接種于盛有40mL液體發酵培養基的250mL搖瓶，于33～35℃，180～220rpm搖床中培養60～84h，從而獲得誘變的遺傳性狀穩定的純種米根霉菌株。
3.如權利要求2所述的方法，其特征是所述的液體發酵培養基組成及質量含量為：葡萄糖80g、尿素0.1g、KH2PO40.5g、MgSO4·7H2O?0.6g、ZnSO4·7H2O?0.018g、FeSO4·7H2O?0.001、CaCO355g，溶解在1L蒸餾水中，初始PH為5.5。
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