[發明專利]一種雨生紅球藻粉及提取物蝦青素含量測定方法

無效

• 申請號: 201010548237.5
• 申請日: 2010-11-16
• 公開（公告）號: CN102012363A
• 公開（公告）日: 2011-04-13
• 發明（設計）人: 龍祥;王朝軍;杜偉春;楊瑜;張秋玲
• 申請（專利權）人: 云南綠A生物工程有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01J3/42;G01N30/02
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 劉丹妮

1.一種蝦青素含量的測定方法，所述方法采用分光光度計和/或高效液相色譜來測定蝦青素的含量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述采用分光光度計測定蝦青素的含量包括以下步驟：

1)將樣品溶于丙酮中；

2)于474nm處讀取樣品溶液吸光值；

3)按下式計算蝦青素質量百分比：

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述采用高效液相色譜測定蝦青素的含量包括以下步驟：

1)將樣品溶于丙酮，并加入膽甾醇酯酶溶液水解，使溶液中的蝦青素酯水解為游離蝦青素；

2)測定蝦青素的色譜條件如下：C18柱，流動相為丙酮、水和乙酸乙酯，流速為1.2mL/min，梯度洗脫條件為0～20分鐘(82％丙酮+8％水+10％乙酸乙酯)，20～24分鐘(29％丙酮+1％水+70％乙酸乙酯)，24～30分鐘(82％丙酮+8％水+10％乙酸乙酯)，檢測波長為474nm；

3)按下式計算蝦青素含量：

RF-蝦青素＝[P(trans-asta)標+1.2P(9-cis)+1.6P(13-cis)]/C標

C樣＝[P(trans-asta)樣+1.2P(9-cis)+1.6P(13-cis)]/RF-蝦青素

其中，RF-蝦青素＝蝦青素響應因子；C標(μg/mL)為蝦青素標準品濃度，該值可由下式計算出(其中92％為蝦青素比例系數，V(mL)為總稀釋體積)：

C樣(μg/mL)為樣品中蝦青素濃度；P(trans-asta)標為蝦青素標準品峰面積(mV.s.)；P(trans-asta)樣為樣品峰面積(mV.s.)，常數1.2、1.6分別為9-cis(9位順式蝦青素)、13-cis(13位順式蝦青素)在測定條件下與全反式蝦青素響應因子差異校正系數。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的方法，其特征在于，所述蝦青素為雨生紅球藻、雨生紅球藻提取物或雨生紅球藻提取物制劑中包含的蝦青素。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述雨生紅球藻提取物是通過以CO₂為萃取介質的超臨界流體萃取方法制備的，具體的萃取條件如下：溫度為60～80℃，壓力為35～45MPa，CO₂流速為15～25L/h，時間為2～4小時。