[發(fā)明專利]一種檢測牛奶及肉制品中阿莫西林殘留量的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010533069.2
• 申請日: 2010-11-05
• 公開（公告）號: CN102072892A
• 公開（公告）日: 2011-05-25
• 發(fā)明（設計）人: 楊亞玲;徐興志;耿衛(wèi)東
• 申請（專利權）人: 云南健牛生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N21/25
• 代理公司: 云南協(xié)立專利事務所 53108
• 代理人: 謝嘉

技術領域

本發(fā)明屬于食品安全檢測技術領域，涉及動物源食品中殘留抗生素的檢測方法，特別是涉及一種檢測牛奶及肉制品中阿莫西林殘留量的方法。

背景技術

牛奶、肉制品等動物源食品普遍含有蛋白質、脂肪、氨基酸、糖類、鹽類、鈣、磷、鐵等豐富的營養(yǎng)物質，隨著人民生活水平的不斷提高，其在居民的膳食結構中所占比重也越來越大。阿莫西林因其具有其廉價、劑型多、抗菌譜廣、療效高、療程短等優(yōu)點，廣泛應用于畜牧業(yè)生產中，用于預防和治療畜禽疫病。阿莫西林的大量使用導致其在多數(shù)動物源食品中均有殘留，人們食用阿莫西林殘留量超標的動物源食品后，會對人體健康造成危害。最常見的如阿莫西林引起的過敏反應。還有就是藥物的耐藥性，由于動物生長過程中長期大量使用阿莫西林，使得動物體內的細菌產生了耐藥性，細菌對阿莫西林產生耐藥性后往往對人使用的同種或同類抗生素也產生耐藥性，致使阿莫西林無法控制人體細菌感染性疾病，其后果不堪設想。為了避免消費者受到阿莫西林殘留的危害，各國都有相應法規(guī)規(guī)定最高殘留量的標準。在美國，規(guī)定牛的可食用組織中阿莫西林殘留限量值為0.01mg/L；歐盟規(guī)定牛奶中阿莫西林的殘留限量為0.004mg/L；日本規(guī)定雞蛋中阿莫西林殘留限量為0.01mg/L。我國農業(yè)部2001年頒布實施了《無公害食品生鮮牛乳行業(yè)標準》，對新鮮牛乳的衛(wèi)生指標明確了“抗生素不得檢出”。

現(xiàn)有技術中，已應用于阿莫西林殘留檢測的技術主要有微生物檢測法如TTC法，免疫分析法如ELISA檢測法、熒光免疫測定法，色譜檢測法如HPLC、GC法等。上述方法在檢測精密度等方面各有所長，有的靈敏度低、選擇性差；有的操作過程步驟較為繁瑣，有的需購置昂貴儀器，但大都存在檢測耗時長、成本高的缺點，在具體實際應用中造成不便。本發(fā)明人在已公開的專利201010109375.3中闡述了類似檢測方法，但也還存在檢測靈敏度低、熒光檢測穩(wěn)定性不夠理想等缺點。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種操作簡便、快速、檢測結果準確、靈敏度高、穩(wěn)定性強的檢測牛奶及肉制品中阿莫西林殘留量的方法。

本發(fā)明的目的通過以下技術方案予以實現(xiàn)。

除非另有說明，本發(fā)明所采用的百分數(shù)均為重量百分數(shù)。

一種檢測牛奶及肉制品中阿莫西林殘留量的方法，包括以下步驟：

(1)荷移體系的形成：配制阿莫西林濃度0.01～80mg/L的標準水溶液，加入濃度0.1～2％的非離子表面活性劑，用pH緩沖液調節(jié)體系至pH3～9，再與濃度為0.1～1g/L的醌類或茜素類物質在常溫下反應5～40min，得到荷移體系，備用；

(2)測定波長的確定：將步驟(1)得到的荷移體系在熒光分光光度計下確定其熒光的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜，或者在紫外分光光度計下確定其最大紫外可見吸收波長；其中熒光的激發(fā)發(fā)射波長的掃描范圍為220～650nm，紫外可見的掃描范圍為200～600nm；

(3)確定上述荷移體系熒光強度或者紫外吸收強度與阿莫西林的線性范圍、工作曲線，同時計算方法的標準偏差、檢測限及樣品的回收率；

(4)樣品前處理：

I、牛奶：取5.0～25.0g牛奶，加入10～30mL三氯乙酸、無水乙醇或是濃度為5％～10％V/V的高氯酸、或是pH2.0～4.4的酸化乙腈中的一種，混勻，在轉速3000～10000r/min條件下離心分離5～20min，取上清液備用；

II、肉樣：取5.0～25.0g剁碎的肉樣，加入10～30mL三氯乙酸、無水乙醇、乙腈或是濃度為5％～10％V/V的高氯酸、或是濃度為0.05～0.5mol/L的鹽酸中的一種，超聲5～15min后，在3000～10000r/min條件下離心分離5～20min，取上清液備用；

(5)樣品測定：取步驟(4)所得上清液，按照步驟(1)所述的條件進行荷移反應，得到樣品的荷移體系，在步驟(2)所確定的熒光激發(fā)發(fā)射光譜或者紫外最大吸收波長下，測定樣品荷移體系的熒光強度或者紫外吸光度，再對照步驟(3)所得的荷移體系工作曲線，計算出樣品中的阿莫西林殘留量。

步驟(1)中，所述的非離子表面活性劑為曲拉通-110、吐溫-20、吐溫-80、司盤-20、司盤-40、司盤-60或司盤-80中的一種，所選用的醌類物質為四氯苯醌、四氰基對二次甲基苯醌、2，3-二氯-5，6二氰苯醌、氯醌酸、對苯醌、萘醌或1，4-二羥基蒽醌中的一種，茜素類物質為茜素綠或茜素紅中的一種。

同現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點或者積極效果：