[發明專利]多孔殼聚糖支架、神經干細胞多孔殼聚糖支架及其用途無效
| 申請號: | 201010532905.5 | 申請日: | 2010-11-04 |
| 公開(公告)號: | CN101979104A | 公開(公告)日: | 2011-02-23 |
| 發明(設計)人: | 金國華;衣昕;田美玲;秦建兵;毛偉峰;高宜錄 | 申請(專利權)人: | 南通大學 |
| 主分類號: | A61L27/20 | 分類號: | A61L27/20;A61L27/38 |
| 代理公司: | 南通市永通專利事務所 32100 | 代理人: | 葛雷 |
| 地址: | 226019*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 多孔 聚糖 支架 神經 干細胞 及其 用途 | ||
1.一種多孔殼聚糖支架,其特征是:由下列方法制備而成:將殼聚糖溶于乙酸中成為2%W/V的溶液,向細胞培養板的孔中加入該溶液,蓋好,于4℃預冷,再置于-28℃冷凍過夜,后在-60℃下冷凍干燥,然后向細胞培養板的孔中加入NaOH水化處理,再用PBS清洗,最后再進行兩次-60℃冷凍干燥,得到多孔殼聚糖支架。
2.根據權利要求1所述的多孔殼聚糖支架,其特征是:由下列方法制備而成:將殼聚糖溶于1%乙酸中成為2%W/V的溶液,向24孔細胞培養板每孔中加入1ml該溶液,蓋好,于4℃預冷6h,再置于-28℃冷凍過夜,后在-60℃下冷凍干燥24h,然后向每孔中加入0.1mol/L?NaOH?1ml水化20min,再用pH7.2的0.01mol/L?PBS清洗3次,最后再進行兩次各24小時-60℃冷凍干燥,得到多孔殼聚糖支架。
3.一種神經干細胞多孔殼聚糖支架,其特征是:由下列方法制成:取神經干細胞克隆球接種于培養孔內滅菌的殼聚糖多孔支架上,加入DMEM/F12無血清培養基或加入含NGF的DMEM/F12無血清培養基,培養得到神經干細胞多孔殼聚糖支架。
4.根據權利要求3所述的神經干細胞多孔殼聚糖支架,其特征是:由下列方法制成:取神經干細胞克隆球以1×105個/ml的密度,接種于培養孔內滅菌的殼聚糖多孔支架上,加入DMEM/F12無血清培養基1.5ml或加入含100ng/ml?NGF的DMEM/F12無血清培養基1.5ml,培養板置飽和濕度、37℃、5%CO2培養箱中培養2周,每隔4天換1/2培養液,得到神經干細胞多孔殼聚糖支架。
5.一種神經干細胞多孔殼聚糖支架在制備修復腦損傷的制品中的應用。
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