[發明專利]一種血清鐵含量的檢測方法及其專用標準品

有效

• 申請號: 201010532904.0
• 申請日: 2010-11-02
• 公開（公告）號: CN102053068A
• 公開（公告）日: 2011-05-11
• 發明（設計）人: 王清濤;黃妍;馬懷安;徐靜;張建平
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學附屬北京朝陽醫院
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/38
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.一種血清鐵含量的檢測方法，包括如下步驟：

1)A、通過稱量質量的方法得到所需質量的標準品溶液和所需質量的蛋白沉淀試劑，將所需質量的標準品溶液與所需質量的蛋白沉淀試劑混勻，放置；離心，收集上清液，記作上清液I；

B、通過稱量質量的方法得到所需質量的上清液I和所需質量的色原試劑，將所需質量的上清液I與所需質量的色原試劑混勻，離心，取上清液，記作上清液II；

C、在562nm波長下檢測上清液II的吸光度值；

D、以標準品溶液的濃度值為橫坐標，以對應的吸光度值為縱坐標，建立一元線性回歸曲線，即得到標準曲線；

2)通過稱量質量的方法得到所需質量的待測樣品，用所需質量的待測樣品替換步驟1)中的標準品溶液，按照步驟1)中A-C的方法進行檢測，得到待測樣品對應的吸光度值；根據所述標準曲線，得到待測樣品中鐵的含量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：

所述標準品溶液的按照如下方法制備：

1)通過稱量質量的方法得到所需質量的鐵和所需質量的水，將所需質量的鐵用濃鹽酸溶解后，加入所需質量的水，得到高濃度鐵標準貯備液，所述鐵離子在所述高濃度鐵標準貯備液中濃度為1.0000mg/g；

2)通過稱量質量的方法得到所需質量的步驟1)得到的高濃度鐵標準貯備液和所需質量的濃度為0.1mol/L的鹽酸水溶液，將所需質量的步驟1)得到的高濃度鐵標準貯備液和所需質量的濃度為0.1mol/L的鹽酸水溶液混合，得到中濃度鐵標準貯備液，所述鐵離子在所述中濃度鐵標準貯備液中的濃度為50.0000μg/g；

3)通過稱量質量的方法得到所需質量的步驟2)得到的中濃度鐵標準貯備液和所需質量的濃度為0.1mol/L的鹽酸水溶液，用所需質量的濃度為0.1mol/L的鹽酸水溶液稀釋所需質量的步驟2)得到的中濃度鐵標準貯備液，得到標準品溶液；所述鐵離子在所述標準溶液中的濃度為以下6種：0.2500ug/g、0.5000ug/g、1.0000ug/g、1.5000ug/g、2.0000ug/g和3.000ug/g。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：

所述步驟1)的步驟A中，標準品溶液的量為2.00±0.01g，所述蛋白沉淀試劑的量為2.08±0.01g；

所述步驟1)的步驟B中，上清液I的量為2.04±0.01g，所述色原試劑的量為1.14±0.01g；

所述步驟2)中，所述待測樣品的量為2.02±0.01g。

4.根據權利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述步驟1)的步驟A中，所述放置的時間為15min，所述離心力為1500g，所述離心的時間為15min；

所述步驟1)的步驟B中，所述離心力為1500g，所述離心的時間為10min。

5.根據權利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：

所述蛋白沉淀試劑按照如下方法制備：將抗壞血酸、濃度為500g/l的三氯乙酸水溶液、濃度為6mol/l的鹽酸水溶液和水混合，所述抗壞血酸、所述三氯乙酸和所述濃度為6mol/l的鹽酸水溶液的配比為5g∶500g∶33ml；

所述色原試劑按照如下方法制備：將亞鐵嗪、濃度為4mol/l的三水醋酸鈉水溶液和硫脲混合，所述亞鐵嗪、所述三水醋酸鈉和所述硫脲的配比為525mg∶544.4g∶15g。

6.根據權利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：

所述標準品中，所述鐵為鐵標準物質SRM937。

7.根據權利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：

所述待測樣本為無HIV疾病、無梅毒疾病、無肝炎疾病、無溶血、無黃疸且非乳糜的離體血清。