[發(fā)明專利]腫瘤細胞代謝放射性氣體的收集方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010530658.5
• 申請日: 2010-11-04
• 公開（公告）號: CN102466809A
• 公開（公告）日: 2012-05-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張昊文;劉芬菊;劉建軍;武書;蔣昕;徐媛媛
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類號: G01T7/02
• 分類號: G01T7/02;G01T1/167
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.腫瘤細胞代謝放射性氣體的收集方法，其特征在于包括以下步驟：

步驟①，將1.0～3.0×10⁶HCT116細胞接種至培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)至細胞貼壁；

步驟②，移除原有培養(yǎng)基，加入2～3ml的完全培養(yǎng)基和100μL的放射性培養(yǎng)基，并對培養(yǎng)瓶進行密封；所述的放射性培養(yǎng)基中含有¹⁴C-葡萄糖；

步驟③，加入2～3ml氫氧化海胺于閃爍瓶，將閃爍瓶瓶口密封；

步驟④，通過真空采血針組件分別連接培養(yǎng)瓶及閃爍瓶，放入37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15分鐘至3小時；

步驟⑤，培養(yǎng)結(jié)束時，用醫(yī)用注射器向培養(yǎng)瓶中一次性注入H₂SO₄，終止細胞代謝反應(yīng)，將備用細胞計數(shù)；

步驟⑥，注射完畢后，令注射器活塞退至平衡位置，將整個裝置在30～40℃下恒溫靜置12～24小時；

步驟⑦，向閃爍瓶內(nèi)注入5～10mL閃爍液，并將閃爍瓶內(nèi)的液體混勻至澄清，避光若干小時后，放入計數(shù)儀內(nèi)，測量每分¹⁴C放射性計數(shù)，測定¹⁴CO₂的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腫瘤細胞代謝放射性氣體的收集方法，其特征在于：步驟②所述的¹⁴C-葡萄糖的添加量為0.1～2μCi。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腫瘤細胞代謝放射性氣體的收集方法，其特征在于：步驟②所述的完全培養(yǎng)基添加量為2ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腫瘤細胞代謝放射性氣體的收集方法，其特征在于：步驟②與步驟③所述的密封分別為用翻口乳膠塞和封口膜密封培養(yǎng)瓶瓶口；用翻口乳膠塞和封口膜密封閃爍瓶瓶口。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腫瘤細胞代謝放射性氣體的收集方法，其特征在于：步驟④所述的真空采血針組件是兩端帶有針尖的聯(lián)通導(dǎo)管，其兩端的針尖分別連接培養(yǎng)瓶及閃爍瓶。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腫瘤細胞代謝放射性氣體的收集方法，其特征在于：所述的計數(shù)儀為Quantulus?1220低本底液體閃爍計數(shù)儀。