[發明專利]一種通過BMP15基因高效快速檢測綿羊高繁殖性狀的方法

無效

• 申請號: 201010517378.0
• 申請日: 2010-10-25
• 公開（公告）號: CN102051411A
• 公開（公告）日: 2011-05-11
• 發明（設計）人: 史洪才;白杰;馮利君;牛志剛;梁慶玲;楊丹
• 申請（專利權）人: 新疆維吾爾自治區畜牧科學院中國—澳大利亞綿羊育種研究中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 烏魯木齊新科聯專利代理事務所(有限公司) 65107
• 代理人: 歐詠

1.一種通過BMP15基因高效快速檢測綿羊高繁殖性狀的方法，其特征在于：包括1)在策勒黑羊BMP15基因編碼序列中新發現的一個SNP位點，其位點位于Genebank序列(序列號為：NM_001114767.1)從BMP15基因序列的起始密碼子ATG開始+755位點，發生了T→C突變(簡稱T755C)；2)人工合成一對核苷酸序列作為檢測T755C位點的引物，其正向引物：5′-gaagaccaaacctctccctaagg-3′；反向引物：5′-tactttcaggcccatcatgctcc-3′；上下游引物長度均為23bp，將其結合到綿羊BMP15基因相應的模板鏈上，并擴增到含有E+755位點的核酸序列；3)提取DNA，利用引物擴增PCR，將產物用2％瓊脂糖凝膠電泳檢測，用溴化乙錠染色，以凝膠成像確定已擴增的目的條帶；4)利用限制性內切酶ApaI對PCR產物進行消化，消化后用8％丙烯酰胺凝膠電泳，硝酸銀染色，以凝膠成像鑒別該綿羊個體在T755C位點的基因型，將其不同的基因型作為綿羊高繁殖性狀的分子標記，用于輔助選擇育種；

上步的T755C位點突變后，造成BMP15蛋白的結構和功能發生改變，顯著改變了母羊的產羔數；

上步酶切消化產物大小為140bp時，表示該個體沒有高繁殖性能；酶切消化產物大小為120bp和140bp兩條帶時，表示該個體具有高繁殖性能。

2.按照權利要求1所述檢測綿羊高繁殖性狀的方法，其特征在于：利用限制性內切酶Apa?I識別T755C位點，此序列為C時能切開，序列為T時不能被切開。

3.按照權利要求1所述檢測綿羊高繁殖性狀的方法，其特征在于：獲取的BMP15基因T755C位點，因不同基因型個體間具有不同的繁殖性狀，其不同的基因型可以作為綿羊高繁殖性狀的分子標記。

4.按照權利要求1所述檢測綿羊高繁殖性狀的方法，其特征在于：實驗選用的試劑與藥劑均為市售產品。