[發明專利]一種利用生物標記物估算傳統固態發酵過程真菌生物量的方法

無效

• 申請號: 201010509950.9
• 申請日: 2010-10-18
• 公開（公告）號: CN102453744A
• 公開（公告）日: 2012-05-16
• 發明（設計）人: 周榮清;秦臻;鄭佳;黃鈞
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06;G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用生物標記物估算傳統固態發酵過程真菌生物量的方法，包括以下步驟：

a)采集用于實驗的固態發酵樣品，粉碎混勻，稱取適量樣品，加入甲醇10-30ml，超聲處理2-10min；

b)向步驟a)得到的混合液中加入乙醇10-50ml，氫氧化鉀0.2-1g，90℃水浴回流皂化60-120min，冷卻后加入適量蒸餾水稀釋；

c)將步驟b)中獲得的皂化液經60-120ml有機溶劑分3次萃取，收集有機相，經減壓蒸餾除去有機溶劑；

d)將步驟c)得到的麥角固醇提取物溶于甲醇中，利用高效液相色譜儀(HPLC)分析測定其含量；

e)結合相關的數據處理方法，處理步驟d)得到的數據，并依此對相關固態發酵樣品真菌生物量進行估算。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟a)中：實驗材料可以為各類傳統固態發酵過程產物，如：食醋醋曲、白酒大曲、醬油曲、豆瓣瓣醅、釀酒糟醅等。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟c)中，萃取使用的有機溶劑可以為石油醚、甲苯、正戊烷、正己烷中的任意一種或幾種。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟e)中，高效液相色譜儀檢測條件為：進樣量20ml，流動相：100％甲醇；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；檢測波長：282nm。