[發明專利]一種保護霞水母毒素生物活性的方法

無效

• 申請號: 201010508895.1
• 申請日: 2010-10-10
• 公開（公告）號: CN102002094A
• 公開（公告）日: 2011-04-06
• 發明（設計）人: 李鵬程;李榮鋒;于華華;馮金華;邢榮娥;劉松;秦玉坤;李克成;孟祥濤;崔金會
• 申請（專利權）人: 中國科學院海洋研究所
• 主分類號: C07K1/00
• 分類號: C07K1/00;C07K1/14;C07K14/435
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 許宗富;周秀梅

1.一種保護霞水母毒素生物活性的方法，其特征在于：在霞水母毒素內添加金屬酶抑制劑或酸性蛋白酶抑制劑，進而有效保護霞水母毒素生物活性。

2.按權利要求1所述的保護霞水母毒素生物活性的方法，其特征在于：所述在0.5-5mg/ml的霞水母毒素內添加終濃度0.1-20mM的金屬酶抑制劑EDTA或終濃度2-6μg/mL的酸性蛋白酶抑制劑Pepstantin?A，進而抑制毒素中蛋白酶的溶血活性。

3.按權利要求1或2所述的保護霞水母毒素生物活性的方法，其特征在于：所述霞水母毒素按如下步驟進行提取：

1)將冷凍于-80--20℃下的霞水母觸角于0-8℃自溶2-96h，而后以0-8℃下5000-30000g離心5-30min，收集沉淀霞水母刺絲囊細胞，待用；

2)將上述每5-50mg的霞水母刺絲囊細胞內加入0.5-2mL在0-8℃預冷的10-30mM?pH6.0-8.0緩沖液，然后在振動頻率2500-5000rpm下破碎1-5min，其中每破碎10-30s將霞水母刺絲囊細胞取出置于冰水中冷卻1-5min；

3)將破碎后霞水母刺絲囊細胞在0-8℃下，5000-30000g離心5-30min，上清液即為霞水母刺絲囊細胞毒素。

4.按權利要求3所述保護霞水母毒素生物活性的方法，其特征在于：所述步驟1)中自溶后用20-60目的標準分樣篩濾去除觸手殘片。

5.按權利要求3所述保護霞水母毒素生物活性的方法，其特征在于：所述步驟2)中霞水母刺絲囊破碎時利用Mini-Beadbeater組織研磨器破碎；所述緩沖液為PBS緩沖液或Tris-HCl緩沖液。