[發明專利]一種檢測注射用益氣復脈中的大分子物質的方法

有效

• 申請號: 201010506094.1
• 申請日: 2010-10-14
• 公開（公告）號: CN102445500A
• 公開（公告）日: 2012-05-09
• 發明（設計）人: 葉正良;周大錚;韓曉萍;王薇丹;李德坤
• 申請（專利權）人: 天津天士力之驕藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所 11130
• 代理人: 王為

技術領域

本發明屬于藥學領域，涉及一種注射制劑的檢測方法，具體涉及一種檢測注射用益氣復脈中的大分子物質的方法。

背景技術

中藥制劑化學成分復雜，種類繁多，本身又多為大分子物質，這些大分子如蛋白質、多肽、糖、鞣質、果膠等既有免疫原性，又具有免疫反應性，因此具有致敏的可能性。中藥注射劑直接作用于靜脈，起效快，但是一旦有副作用，就會產生嚴重的后果。2009年7月，國家食品藥品監督管理局出臺了《中藥注射劑安全性再評價質量控制要點》，明確要求對于具體品種的工藝條件下可能存在、而質量研究中未檢出的大類成份，應建立排除性檢查方法。必要時，應建立高分子量物質檢查項。

本發明正是基于這一要求展開，建立了一種簡便快捷的方法檢測注射用益氣復脈(凍干)中的大分子物質。

其中，所述注射用益氣復脈(凍干)是由紅參、麥冬、五味子制成的用于靜脈滴注的中藥復方制劑，具有益氣復脈，養陰生津的療效。主要用于冠心病勞累性心絞痛氣陰兩虛證，癥見胸痹心痛，心悸氣短、倦怠懶言、頭暈目眩、面色少華、舌淡、少苔或剝苔，脈細弱或結代；冠心病所致慢性左心功能不全II、III級氣陰兩虛證，癥見心悸、氣短甚則氣急喘促，胸悶隱痛，時作時止，倦怠乏力，面色蒼白，動則汗出，舌淡、少苔或剝苔，脈細弱或結代。

注射用益氣復脈(凍干)性狀：本品為淺黃色的疏松塊狀物；有引濕性。取1瓶內容物，加水2～3ml溶解后，為棕紅色澄明液體。用法用量：靜脈滴注。每日1次，每次8瓶，用250ml～500ml?5％葡萄糖注射液或生理鹽水稀釋后靜脈滴注。每分鐘約40滴。療程2周。

本發明采用高效凝膠色譜法，用來檢測注射用益氣復脈(凍干)中的大分子物質。本發明的檢測方法操作上更加簡便、快捷，而且準確性高，穩定性好。

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測注射用益氣復脈(凍干)中的大分子物質的方法。

本發明采用高效凝膠色譜法(HPGPC)檢測注射用益氣復脈(凍干)中的大分子物質。

本發明所述的檢測注射用益氣復脈中的大分子物質的方法，包括以下步驟：

1)對照品的制備

取右旋糖苷對照品，分子量分別為180，2500，4600，7100，10000，21400，41100，84400，133800，各自用氯化鈉注射液配制成各自的溶液，其中水為重蒸水，氯化鈉為分析純；

2)供試品溶液的制備

稱取注射用益氣復脈，用氯化鈉注射液溶解；

3)測定方法

分別精密吸取供試品溶液和對照品溶液各10-20ul注入凝膠色譜儀，記錄色譜圖。

其中，所述高效凝膠色譜條件為：

色譜柱為Ultrahydrogel?250?7.8*300mm；流動相0.1mol·L^-1氯化鈉溶液；流速0.3mL·min^-1；柱溫30℃；示差折光檢測器：40℃，進樣量：20μL。

依據凝膠色譜的分離原理：相同實驗條件下，物質的分子量越大，保留時間越短；分子量越小，保留時間越長。示差折光檢測器是高度穩定和靈敏的液相色譜和凝膠滲透色譜檢測器，可用于檢測在紫外光范圍內吸光度不高的化合物，如聚合物、糖、有機酸和甘油三酸酯。示差折光檢測器的偏轉式設計，能夠對那些具有低噪音和位移特性的化合物進行靈敏的檢測。

對于中藥注射劑中的大分子物質的排除性檢測方法的確立，目前尚無法規性的方法可參照，本研究中的方法學驗證以《中國藥典》2010年版一部附錄ⅩⅧ中藥質量標準分析方法驗證指導原則為基礎確立的。

本發明發現，圖譜中樣品出峰時間高于30分鐘，可判斷樣品中無大分子物質或含量極低。

因此通過本發明提供的測定方法，通過保留時間的長短，可判斷注射用益氣復脈(凍干)中是否含有大分子物質。

本發明所述的檢測方法，具有操作簡便，靈敏度高，檢測速度快，準確性強，專屬性強，重復性好等諸多優點。

附圖說明

圖1、9個不同分子量右旋糖酐對照品及空白對照的液相圖譜

圖2、不同濃度2中右旋糖苷最低檢測限對照品色譜圖(A.右旋糖酐M4600，B.右旋糖酐M10000)

圖3、5批注射用益氣復脈(凍干)的測定色譜圖

圖4、樣品在輔助注射液中的穩定性

具體實施方式

通過以下具體實施例對本發明作進一步說明，但不作為對本發明的限制。

實施例1、檢測方法

儀器