[發明專利]判定大黃有效成分的方法

有效

• 申請號: 201010504500.0
• 申請日: 2010-10-13
• 公開（公告）號: CN101978994A
• 公開（公告）日: 2011-02-23
• 發明（設計）人: 王志香;陳淑芳;牛志勇;武路剛;趙素娟;郭艷玉;劉志輝
• 申請（專利權）人: 河北科星藥業有限公司
• 主分類號: A61K36/708
• 分類號: A61K36/708;G01N30/90;A61P31/04;A61K125/00
• 代理公司: 石家莊科誠專利事務所 13113
• 代理人: 劉謨培

技術領域

本發明屬于醫學檢驗測定技術領域，涉及一種判定中藥材原料中有效成分的方法，具體地說是一種能夠準確判定大黃有效成分的方法。

背景技術

大黃為蓼科植物掌葉大黃(Rheum?palmatum?L)、塘沽特大黃(Rheum?tanguticum?Maxim.ex?Balf)或藥用大黃(Rheum?officinale?Baill)的干燥根及根莖，其性寒、味苦，具有瀉熱通腸、涼血解毒、逐瘀通經等功效。大黃的化學成分中已被闡明化學結構的有至少13種以上，其主要成分為蒽醌類化合物，其中游離的羥基蒽醌類化合物主要為大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃素甲醚和大黃酚。現代藥理研究表明，游離的蒽醌化合物為大黃的主要抗菌成分，其中蘆薈大黃素、大黃素及大黃酸的抗菌作用較強，對多數革蘭陽性細菌均具有抑制作用。中藥大黃的偽品在市場上流通的有很多種，如華北大黃、河套大黃、天山大黃、信州大黃等，在大黃偽品中土大黃苷的含量較高而幾乎不含大黃酸，為了保證用藥安全、有效，在對大黃有效成分進行鑒定時，通常將這五種羥基蒽醌類化合物作為薄層鑒別的主斑點，并不得檢視出土大黃苷的斑點。

目前，薄層檢視方法多采用在紫外燈365nm下檢視和氨蒸汽熏蒸后在日光下檢視。土大黃苷在紫外光燈下顯藍紫色熒光，五種蒽醌類化合物均顯黃色熒光，因此在紫外燈下檢視應為五個黃色熒光斑點，而不得有持久的藍紫色熒光斑點。羥基蒽醌類化合物在堿性溶液中顏色加深，多呈紅色或紫紅色，并且此種紅色物質不溶于有機溶劑，加酸則顏色褪去。氨蒸汽熏蒸檢測法就是利用該類化合物遇堿變紅的特性進行的，但是由于氨蒸汽易于揮發，當樣品從氨蒸汽中取出后，隨著氨蒸汽的揮發，紅色會很快褪去，從而給檢視帶來不便，進一步地會造成判定誤差。

發明內容

本發明要解決的技術問題，是提供一種能夠準確判定大黃有效成分的方法，此法常規方法的前述不足，當它使斑點變為紅色時，該紅色斑點可以長時間保存，不易褪色或消失，便于從容檢視，確保檢測結果的準確性。

本發明為解決上述技術問題，所采用的技術方案是：

一種判定大黃有效成分的方法，按照如下步驟順序進行：

a.樣品制備：取大黃藥材粉末加入甲醇浸泡1h，其中大黃藥材粉末質量與甲醇體積之比為1g∶200ml，過濾，取濾液，于60～80℃水浴上蒸干，在蒸干后剩余固體中加入水使其完全溶解，再加入鹽酸加熱回流30min，立即冷卻，用乙醚分2次震搖提取，合并兩次的乙醚提取液，蒸干，在蒸干后剩余固體中加入三氯甲烷使其完全溶解，作為樣品溶液；

b.對照組樣品溶液制備：取已鑒定為合格的大黃藥材制作對照組樣品，按照步驟a中樣品制備的方法進行處理，制得對照藥材溶液；

c.對照品溶液制備：取大黃酸作為對照品，加甲醇制成1mg/ml的溶液，作為對照品溶液；

d.點樣：將樣品溶液、對照藥材溶液和對照品溶液點于同一硅膠H板上；

e.展開：將點樣后的硅膠H薄層板放在盛有展開劑的展開槽中進行展開；

f.檢視：

①在365nm波長的紫外光燈下檢視，在樣品溶液色譜中，與對照藥材色譜相應的位置上，應顯現完全相同的五個橙黃色熒光主斑點；在與對照品溶液色譜相應的位置上，顯現完全相同的黃色熒光斑點；

②向展開后的硅膠H薄層板上噴顯色劑堿性有機溶液，斑點變為紅色；

如果同時滿足①與②兩個條件，則可由此判定所檢測的大黃藥材原料中含有有效成分大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃素甲醚和大黃酚；否則所檢樣品為偽品大黃。

說明：檢視步驟中所述“完全相同”，意指樣品溶液色譜中與對照藥材色譜中所顯現的斑點顏色完全相同。

作為本發明的限定，所述展開劑為石油醚、甲酸乙酯和甲酸的混合溶液，其中石油醚、甲酸乙酯、甲酸的體積比是15∶5∶1；所述石油醚的溫度為30～60℃。

石油醚的溫度不同極性就不同，選30～60℃是因為該餾程范圍內石油醚、甲酸乙酯、甲酸按15∶5∶1的比例混合時的展開結果最佳。

作為本發明的另外一種限定，在檢視步驟f中，所述堿性有機溶液為氫氧化鈉或氫氧化鉀的醇溶液，其中醇選自乙醇、甲醇或異丙醇中的一種，其濃度為0～飽和狀態的濃度。