[發(fā)明專利]血清中甘油三酯的兩步酶測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010300886.3
• 申請日: 2010-01-28
• 公開（公告）號: CN101762577A
• 公開（公告）日: 2010-06-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李立和
• 申請（專利權(quán)）人: 李立和
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 天津市宗欣專利商標(biāo)代理有限公司 12103
• 代理人: 劉瑛

1.一種血清中甘油三酯的兩步酶測定方法，其特征在于雙色原物質(zhì)同在試劑I中，試劑II僅含有脂蛋白脂肪酶有效成分；其測定方法為：血清先與試劑Ⅰ于37℃溫浴3～5分鐘，血清中游離甘油與試劑Ⅰ的反應(yīng)生成醌亞胺，加入試劑Ⅱ后于37℃溫浴4～7分鐘，甘油三酯水解后經(jīng)反應(yīng)也生成醌亞胺；儀器在500-520nm波長處檢測，以試劑Ⅰ反應(yīng)產(chǎn)生的醌亞胺為空白，由試劑Ⅱ反應(yīng)產(chǎn)生的醌亞胺計(jì)算出甘油三酯的含量，計(jì)算公式為：

OD_TG＝OD₂-OD₁×[(SV+R₁V₁)/(SV+R₁V₁+R₂V₂)]

甘油三酯濃度＝F×OD_TG

其中OD_TG是甘油三酯產(chǎn)生的吸光度，OD₁是樣品加入試劑Ⅰ反應(yīng)后測得的吸光度，OD₂是樣品加入試劑Ⅱ反應(yīng)后測得的吸光度，SV是血清樣品的體積，R₁V₁是試劑Ⅰ的體積，R₂V₂是試劑Ⅱ的體積，F(xiàn)是校正因數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清中甘油三酯的兩步酶測定方法，其特征在于試劑Ⅰ中雙色原物質(zhì)一個(gè)為4-氨基安替比林，另一個(gè)選自2，4-二氯酚或苯酚的衍生物。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清中甘油三酯的兩步酶測定方法，其特征在于試劑Ⅰ每升Tris-HCl緩沖液內(nèi)含Tris?0.10mmol～0.20mmol、2，4-二氯酚2.0mmol～4.0mmol、MgSO₄9mmol～15mmol、膽酸鈉3.0mmol～5.5mmol、TritonX-1000.08g～0.15g、ATP?0.8mmol～2.0mmol、甘油激酶400U～800U、甘油磷酸氧化酶3000U～4200U、過氧化物酶800U～1600U、4-氨基安替比林0.8mmol～2.4mmol、Proclin-300防腐劑100μl～300μl；試劑Ⅱ每升Tris-HCl緩沖液內(nèi)含Tris?0.10mmol～0.20mmol、脂蛋白脂肪酶16000U～32000U、Proclin-300防腐劑100μl～300μl。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清中甘油三酯的兩步酶測定方法，其特征在于試劑Ⅰ和試劑Ⅱ中Tris-HCl緩沖液的pH值為7.6±0.2。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清中甘油三酯的兩步酶測定方法，其特征在于測定的體積比為：樣品∶試劑I∶試劑II＝1∶75～80∶25～20。