[發明專利]一種松樹針葉的制片觀察方法

無效

• 申請號: 201010300706.1
• 申請日: 2010-01-25
• 公開（公告）號: CN101769836A
• 公開（公告）日: 2010-07-07
• 發明（設計）人: 洪亞平
• 申請（專利權）人: 河南科技大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/34;G01N1/30;G01N21/64;G01N21/84
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 陳浩

技術領域

本發明涉及一種松樹針葉的制片觀察方法，屬于植物顯微技術領域。

背景技術

植物的葉表皮和結構特征是由植物的遺傳本性決定，并受到環境因素的影響，能夠在一 定程度上反映出植物類群之間的系統學關系和生長狀況，在植物分類與系統學、古植物化石 鑒定、植物物證學和育種學，甚至仿生學和美學等領域有著極其重要的研究價值。

植物葉表皮的制片方法很多，依據所使用的主要方法可大致分為直接撕取法、直接刮片 法、印記法、透明膠帶撕取法、鉻酸離析法、次氯酸鈉法等。刮片法可大致分為：(1)直 接刮片法，即采用物理方法，將葉表皮放在載玻片等物品的表面，利用刀片直接剔去所需葉 表皮的上側表皮和葉肉；(2)離析-刮片方法，是先采用化學方法對葉片進行離析處理，然 后再使用物理方法進行刮片，次氯酸鈉法即屬于這種方法；(3)撕取-離析-刮片方法，是 采用直接撕取或利用膠帶、膠膜撕取植物葉表皮，然后利用離析-刮片方法將葉表皮上附著 的葉肉細胞等除去。通常所用的直接刮片法，是將葉片置于載玻片或其他較硬物品的表面， 用單面或雙面刀片刮去葉表皮上側的表皮和葉肉細胞，由于缺乏其他物體的保護和自身柔軟 、不平整等不利因素，葉表皮的刮制操作要求較高，即使精心操作，也常常損傷葉表皮，破 壞其完整性。普通光學顯微鏡和電子顯微鏡在觀察裸子植物的葉表皮和結構特征時，一些特 征難以觀察清楚，而且普通光學顯微鏡觀察在制片上也存在著一些難度和問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種松樹針葉的制片觀察方法。

本發明的技術方案在于采用了一種松樹針葉的制片觀察方法，包括以下步驟：

(1)摘取一片針葉；

(2)將針葉貼在洗衣皂表面進行切片；

(3)將針葉切片轉移至盛水器皿中清洗，以洗去針葉切片表面的殘留物；

(4)將針葉切片轉移到載玻片上，進行透明制片；

(5)進行顯微觀察。

其中，步驟(2)中所述的洗衣皂(浙江納愛斯集團生產的雕牌高級洗衣皂)也可以使 用各種香皂或肥皂等，在制作葉橫切片時，也可以使用一疊報紙、書、作業本或纏有醫用膠 布的手指指肚等軟物，若使用這些軟物代替皂類，所制作的葉橫切片可省略步驟(3)；對于 較硬的洗衣皂在使用前，可以先放入一個塑料袋中，在洗衣皂上撒上少量水，然后包好，以 使較硬的洗衣皂吸水后變得軟硬適宜。

在步驟(4)之前還可以包括對針葉切片進行染色，并在染色完成后進行清洗。所述的 染色，其具體方法包括將洗好的針葉切片放入番紅酒精溶液或者番紅水溶液中染色3-10分鐘 ；所述溶液的濃度為1％，該濃度為質量體積百分比濃度。所述的清洗，其具體方法包括當染 色完成后，將針葉切片轉移到載玻片上，使載玻片適當傾斜，用體積百分比濃度為75％-95％ 的乙醇溶液沖洗針葉切片，待針葉切片不再褪色或者僅微弱褪色時即可；如果針葉橫切片在 染色后產生明顯的沉淀，影響進一步觀察時，可將針葉切片轉移到盛水器皿中，加入洗滌劑 (浙江納愛斯集團生產的超能牌洗潔精或其他廠家生產的洗手液，主要成分為表面活性劑) 后用毛筆攪拌清洗，清洗后轉移到載玻片上，用體積百分比濃度為75％-95％的乙醇溶液沖洗 針葉切片，待針葉切片不再褪色或者僅微弱褪色時即可。

對松樹針葉的葉表皮制片時，步驟(2)中所述的切片，其具體方法包括將針葉蘸水后 貼在洗衣皂表面，刀片沾水后沿葉表面輕輕刮去葉的上側部分，每刮1-3次，將刀片重新沾 水并除去附著在刀刃上的殘渣，待葉的上側表皮和葉肉細胞完全刮去后，即得針葉葉表皮切 片。

對松樹針葉的橫切片制片時，步驟(2)中所述的切片，其具體方法包括將針葉放在洗 衣皂表面，在針葉的要切割處，用刀片的刃角將針葉由左側劃向右側，割下一片橫切薄片； 或者用刀片的刃角將針葉輕輕地割一個開口，然后用刀刃沿著割口切取針葉橫切薄片，這樣 可以防止將針葉過度壓扁，染色時可以挑選薄的橫切片進行染色。必要時，可在解剖鏡下操 作。