[發明專利]一種松樹針葉的制片觀察方法

無效

• 申請號: 201010300706.1
• 申請日: 2010-01-25
• 公開（公告）號: CN101769836A
• 公開（公告）日: 2010-07-07
• 發明（設計）人: 洪亞平
• 申請（專利權）人: 河南科技大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/34;G01N1/30;G01N21/64;G01N21/84
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 陳浩

1.一種松樹針葉的制片觀察方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟：

(1)摘取一片針葉；

(2)將針葉貼在洗衣皂表面進行切片；

對松樹針葉的葉表皮制片時，所述的切片其具體方法包括將針葉貼在洗 衣皂表面，刀片沾水后沿葉表面輕輕刮去葉的上側部分，每刮1-3次，將刀片 重新沾水并除去附著在刀刃上的殘渣，待葉的上側表皮和葉肉細胞完全刮去 后，即得針葉葉表皮切片；

對松樹針葉的橫切片制片時，所述的切片其具體方法包括將針葉貼在洗 衣皂表面，在針葉的要切割處，用刀片的刃角將針葉由左側劃向右側，割下 一片橫切薄片；或者用刀片的刃角將針葉割一個開口，然后用刀刃沿著割口 切取針葉橫切薄片；

對松樹針葉的帶葉表皮的橫切片制片時，所述的切片方法包括將針葉貼 在洗衣皂表面，在針葉的要切割處，用刀片的刃角將針葉割一個開口，然后 用刀刃沿著割口切取針葉橫切薄片，但不要將針葉完全切斷，從未切斷的位 置朝針葉斷口方向輕刮，留下其下側的表皮，并用刀片將該表皮上殘留的葉 肉細胞刮去，然后再切一個橫切薄片，所得橫切片便附帶了一段表皮；

(3)將針葉切片轉移至盛水器皿中清洗，以洗去針葉切片表面的殘留 物；

(4)將針葉切片轉移到載玻片上，進行透明制片；

所述的透明制片方法包括在針葉切片表面滴加無水乙醇和香柏油的混合 液，使其完全覆蓋針葉切片表面，用吸水紙吸去擴散到周圍的白色液體；待 混合液揮發將盡時，再次滴加無水乙醇和香柏油的混合液，重復3-5次；然后 滴加無水乙醇和香柏油的混合液，或者直接滴加香柏油，蓋上蓋玻片，進行 觀察；所述的無水乙醇和香柏油的混合液，其中無水乙醇與香柏油的體積比 為(50-100)∶1；

(5)進行顯微觀察；

所述的顯微觀察，其具體方法包括將制片完成后的載玻片置于顯微鏡載 物臺上，選用普通顯微鏡或者熒光顯微鏡的普通照明光源進行觀察和照相； 或者僅使用熒光顯微鏡的紫外光源，進行觀察和照相；或者同時打開普通照 明光源和紫外光源，其中普通照明光源使用微弱光，以能夠照亮熒光無法照 亮的細胞輪廓為準，然后進行熒光顯微鏡觀察和照相；也可以選用其中的任 意兩種方法或者三種方法均選用進行對比觀察。

2.根據權利要求1所述的一種松樹針葉的制片觀察方法，其特征在于： 在步驟(4)之前還包括對針葉切片進行染色，并在染色完成后進行清洗；

所述的染色，其具體方法包括將洗好的針葉切片放入濃度為1％的番紅酒 精溶液或者1％的番紅水溶液中染色3-10分鐘；其中所述濃度為質量體積百 分比濃度；

所述的清洗，其具體方法包括當染色完成后，將針葉切片轉移到載玻片 上，使載玻片適當傾斜，用體積百分比濃度為75％-95％的乙醇溶液沖洗針葉 切片，待針葉切片不再褪色或者僅微弱褪色時即可。

3.根據權利要求1所述的一種松樹針葉的制片觀察方法，其特征在于： 所述的步驟(4)中首次滴加無水乙醇和香柏油的混合液之前，用蓋玻片蓋住 針葉切片。