[發(fā)明專利]無(wú)糖型復(fù)方扶芳藤制劑中3種主要活性成分的同時(shí)檢測(cè)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010299113.8
• 申請(qǐng)日: 2010-10-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102008541A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-04-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 覃潔萍;鄧家剛;馮軍;李蕓;李耀華;馮旭
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西中醫(yī)學(xué)院
• 主分類號(hào): A61K36/481
• 分類號(hào): A61K36/481;A61K9/00;A61K9/20;A61K9/48;G01N30/02;G01N30/36;A61P7/06;A61P39/00;A61P25/20;A61P25/00;A61P1/14;A61P37/04
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1.一種無(wú)糖型復(fù)方扶芳藤制劑中3種主要活性成分含量的同時(shí)檢測(cè)方法，其特征在于該法采用超聲輔助萃取，僅用一個(gè)色譜條件就可同時(shí)測(cè)定制劑中衛(wèi)矛醇、黃芪甲苷、人參皂苷Rb1的含量。

2.如權(quán)利要求1所述的無(wú)糖型復(fù)方扶芳藤制劑，是由扶芳藤、黃芪、人參(或紅參)制備而成的，是不加蔗糖的合劑(口服液)、膠囊或片劑。

3.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其測(cè)定的色譜條件包括：

以HILIC親水色譜柱為固定相，乙腈-水為流動(dòng)相，梯度洗脫；柱溫為25～30℃；流速為1ml/min；檢測(cè)器為蒸發(fā)光散射檢測(cè)器。

4.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其測(cè)定的色譜條件為：

以phenomenex?Luna?HILIC(250mm×4.6mm?i.d.，5μm)色譜柱為固定相，乙腈(A)-水(B)為流動(dòng)相，其梯度洗脫的體積百分比條件是：0～5min?93％A，5～15min?93％～80％A，15～25min?80％A；柱溫為25～30℃；流速為1ml/min；檢測(cè)器為蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，色譜柱柱效以黃芪甲苷峰計(jì)算不小于15000。

5.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其試樣溶液的制備及測(cè)定方法包括：

(1)對(duì)照品溶液的制備：

①對(duì)照品溶液I的制備：取黃芪甲苷和人參皂苷Rb₁對(duì)照品適量，精密稱定，置容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制得含黃芪甲苷0.5～0.6mg/ml和人參皂苷Rb₁0.1～0.2mg/ml的混合對(duì)照品溶液，即得。

②對(duì)照品溶液II的制備：取衛(wèi)矛醇對(duì)照品適量，精密稱定，置容量瓶中，先加少量水溶解，再加含30％-40％甲醇的水溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，制得濃度為0.8～1mg/ml的衛(wèi)矛醇對(duì)照品溶液，即得。

(2)供試品溶液的制備：

①?gòu)?fù)方扶芳藤膠囊(或片劑)供試品溶液I的制備：取本品裝量差異項(xiàng)下的膠囊內(nèi)容物(或片劑)研細(xì)，取相當(dāng)于原藥材15-25克的細(xì)粉，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入水飽和正丁醇50ml，密塞，超聲提取45min，放冷，濾過(guò)，殘?jiān)盟柡驼〈忌倭慷啻蜗礈欤占癁V液和洗滌液，用氨試液洗滌，取正丁醇層水浴蒸干，殘留物加甲醇溶解并定容至5ml，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液I。

②復(fù)方扶芳藤膠囊(或片劑)供試品溶液II的制備：取上述供試品溶液I制備項(xiàng)下正丁醇提取后留下的殘?jiān)?00ml具塞錐形瓶中，精密加入含30％-40％甲醇的水溶液50ml，密塞，稱重，超聲30min，放冷，補(bǔ)足重量，濾過(guò)，取續(xù)濾液1ml于5ml容量瓶，加30％-40％甲醇至刻度，搖勻；用孔徑為0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液II。

③無(wú)糖型復(fù)方扶芳藤合劑供試品溶液I的制備：精密吸取相當(dāng)于原藥材15-25克的合劑(口服液)，加水飽和的正丁醇50ml，振搖均勻，超聲20min，分取正丁醇層，用氨試液洗滌，棄去氨水層，減壓回收正丁醇，殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ莸?ml，用孔徑為0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液I。

④無(wú)糖型復(fù)方扶芳藤合劑供試品溶液II的制備：取供試品溶液I制備項(xiàng)下正丁醇萃取后留下的下層液，蒸至稠膏狀，加適量硅藻土拌樣分散均勻，轉(zhuǎn)移至100ml具塞錐形瓶中，精密加入含30％-40％甲醇的水溶液50ml，稱重，超聲30min，放冷，補(bǔ)足重量，濾過(guò)，取續(xù)濾液1ml于5ml容量瓶，加30％-40％甲醇至刻度，搖勻；用孔徑為0.45μm的微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液II。

(3)測(cè)定方法

①黃芪甲苷、人參皂苷Rb₁含量測(cè)定法：分別精密吸取黃芪甲苷、人參皂苷Rb₁標(biāo)準(zhǔn)混合溶液5μl、10μl及供試品溶液I?10μl，按權(quán)利要求3、4所述的色譜條件注入高效液相色譜儀，測(cè)定相應(yīng)峰面積，以外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，即得。

②衛(wèi)矛醇含量測(cè)定法：分別精密吸取衛(wèi)矛醇標(biāo)準(zhǔn)溶液2μl、5μl及供試品溶液II?5μl，按權(quán)利要求3、4所述的色譜條件注入高效液相色譜儀，測(cè)定相應(yīng)峰面積，以外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，即得。