[發(fā)明專利]無糖型復(fù)方扶芳藤制劑中3種主要活性成分的同時(shí)檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010299113.8
• 申請日: 2010-10-08
• 公開（公告）號: CN102008541A
• 公開（公告）日: 2011-04-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 覃潔萍;鄧家剛;馮軍;李蕓;李耀華;馮旭
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西中醫(yī)學(xué)院
• 主分類號: A61K36/481
• 分類號: A61K36/481;A61K9/00;A61K9/20;A61K9/48;G01N30/02;G01N30/36;A61P7/06;A61P39/00;A61P25/20;A61P25/00;A61P1/14;A61P37/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種無糖型復(fù)方扶芳藤制劑中3種主要活性成分含量的同時(shí)檢測方法，更確切地講是無糖型復(fù)方扶芳藤制劑中衛(wèi)矛醇、黃芪甲苷和人參皂苷Rb1含量的同時(shí)檢測方法，屬于復(fù)方中藥制劑的分析檢測領(lǐng)域。

背景技術(shù)

復(fù)方扶芳藤制劑是由扶芳藤、黃芪、紅參(或人參)三味中藥經(jīng)適宜的加工、提取而制成的復(fù)方制劑，具益氣補(bǔ)血、健脾養(yǎng)心的功效，有較好的補(bǔ)血、抗疲勞、提高機(jī)體免疫等作用，特別適合于氣血虧虛，精力不足，失眠多夢，神經(jīng)衰弱等患者。扶芳藤的主要成分是衛(wèi)矛醇，而黃芪、紅參(或人參)的主要成分有黃芪甲苷和人參皂苷等成分。現(xiàn)代藥理研究表明，復(fù)方扶芳藤制劑中的衛(wèi)矛醇及皂苷類等成分，具有增強(qiáng)心血管功能、增強(qiáng)造血功能、改善機(jī)體缺血狀態(tài)等多種藥理作用。目前復(fù)方扶芳藤制劑采用的質(zhì)量控制方法是按照《中國藥典》(一部)收載的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中除有TLC鑒別外，只有一個(gè)薄層色譜掃描的含量測定項(xiàng)目，用于測定制劑中黃芪甲苷的含量；顯然現(xiàn)有的質(zhì)量控制方法未能達(dá)到全面控制產(chǎn)品質(zhì)量的目的。在我們的前期研究工作中，曾采用標(biāo)準(zhǔn)加入法測定了復(fù)方扶芳藤合劑中的人參皂苷Rg1和Rb1的含量；應(yīng)用RP-HPLC-UV方法，建立了復(fù)方扶芳藤合劑中主要皂苷成分的HPLC-UV指紋圖譜分析方法及HPLC-UV指紋圖譜共有模式；并有用HPLC-ELSD法測定復(fù)方扶芳藤合劑中黃芪甲苷含量的報(bào)道。扶芳藤是該制劑的君藥。但從目前已經(jīng)建立的復(fù)方扶芳藤制劑的質(zhì)量控制方法來看，這些方法較多的是測定制劑中黃芪、紅參(或人參)的皂苷類成分，而對制劑中扶芳藤的主要成分衛(wèi)矛醇的測定則少見報(bào)道。衛(wèi)矛醇為糖醇類結(jié)構(gòu)，極性較大，并且在紫外區(qū)沒有吸收，因此一直無法用常規(guī)的高效液相色譜法進(jìn)行分析。目前測定衛(wèi)矛醇的方法主要有薄層掃描法，柱前衍生化后用HPLC、GC測定的方法，這些方法均存在實(shí)驗(yàn)操作步驟繁瑣，實(shí)驗(yàn)條件不好控制等缺點(diǎn)。我們過去曾經(jīng)報(bào)道過用正相色譜的氨基柱結(jié)合ELSD檢測器分析測定復(fù)方扶芳藤膠囊中黃芪甲苷和衛(wèi)矛醇的含量，但該法用的是正相柱，其缺點(diǎn)是當(dāng)流動(dòng)相含水量稍多時(shí)，固定相易流失，ELSD的基線噪音很大，從而影響了方法的重復(fù)性及穩(wěn)定性，并且色譜柱的壽命較短。到目前為止，尚未有只用一個(gè)色譜系統(tǒng)就可同時(shí)測定復(fù)方扶芳藤制劑中3個(gè)藥材的特征成分衛(wèi)矛醇、黃芪甲苷和人參皂苷含量的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的解決方案是提供一種無糖型復(fù)方扶芳藤制劑中衛(wèi)矛醇、黃芪甲苷和人參皂苷Rb1含量的同時(shí)檢測方法。該法采用超聲輔助萃取法提取，并以新近開發(fā)的HILIC(Hydrophilic?Interaction?LiquidChromatography)親水色譜柱為固定相，以乙腈-水為流動(dòng)相，只用一個(gè)色譜條件便可同時(shí)測定該制劑中衛(wèi)矛醇、黃芪甲苷、人參皂苷Rb1的含量。經(jīng)科學(xué)實(shí)驗(yàn)證明，該法簡便、快速、準(zhǔn)確性和重復(fù)性較好，可同時(shí)測定該制劑中3個(gè)藥材的特征成分的含量，既可用于無糖型復(fù)方扶芳藤制劑成品的質(zhì)量控制，也可用于生產(chǎn)中各中間體的質(zhì)量控制。

本發(fā)明無糖型復(fù)方扶芳藤制劑中3種主要活性成分的同時(shí)檢測方法包括以下步驟：

1.對照品溶液的制備：

①對照品溶液I的制備：取黃芪甲苷和人參皂苷Rb₁對照品適量，精密稱定，置容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得含黃芪甲苷和人參皂苷Rb₁的混合對照品溶液。

②對照品溶液II的制備：取衛(wèi)矛醇對照品適量，精密稱定，置容量瓶中，先加少量水溶解，再加稀甲醇水溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得衛(wèi)矛醇對照品溶液。

2.供試品溶液的制備：

①復(fù)方扶芳藤膠囊(或片劑)供試品溶液I的制備：取本品裝量差異項(xiàng)下的膠囊內(nèi)容物(或片劑)研細(xì)，取細(xì)粉適量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入水飽和正丁醇適量，密塞，超聲提取，放冷，濾過，殘?jiān)盟柡驼〈忌倭慷啻蜗礈欤占癁V液和洗滌液，用氨試液洗滌，取正丁醇層水浴蒸干，殘留物加甲醇溶解并定容，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，得供試品溶液I。

②復(fù)方扶芳藤膠囊(或片劑)供試品溶液II的制備：取上述供試品溶液I制備項(xiàng)下正丁醇提取后留下的殘?jiān)镁呷F形瓶中，精密加入稀甲醇水溶液適量，密塞，稱重，超聲，放冷，補(bǔ)足重量，濾過，取續(xù)濾液稀釋，定容；用孔徑為0.45μm的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液II。