[發明專利]一種固定化環糊精葡萄糖苷轉移酶及其制備方法和應用無效
| 申請號： | 201010297075.2 | 申請日： | 2010-09-30 |
| 公開（公告）號： | CN101974508A | 公開（公告）日： | 2011-02-16 |
| 發明（設計）人： | 陳堅;堵國成;李江華;劉龍;張子臣 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N11/10 | 分類號： | C12N11/10;C12N11/04;C12P19/60 |
| 代理公司： | 北京匯信合知識產權代理有限公司 11335 | 代理人： | 王秀麗 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 固定 環糊精 葡萄 糖苷 轉移酶 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種固定化環糊精葡萄糖苷轉移酶的制備的方法，其特征在于，首先環糊精葡萄糖苷轉移酶的酶液中加入分子篩，其次加入戊二醛使混合液交聯，然后經海藻酸鈉和氯化鈣的包埋，得到固定化的環糊精葡萄糖苷轉移酶。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶液為去除菌體后的發酵液或上述發酵液去除雜質得到的精制酶液。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，分子篩濃度為2-10mg/mL，混合液置于轉速為150rpm的搖床，充分吸附1-10h。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，戊二醛濃度為10-20μL/mL，交聯時間為4-10h。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，海藻酸鈉濃度為20mg/mL海藻酸鈉，混勻后4℃冰箱過夜脫氣。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，逐滴滴入濃度為3-10％CaCl2溶液使之硬化1-4h，蒸餾水沖洗至無蛋白析出后收集膠囊。
7.權利要求1至6任一所述的方法制備得到的固定化環糊精葡萄糖苷轉移酶，其特征在于，酶促反應的最適溫度范圍為35-45℃，最適pH范圍為4.5-6.5。
8.一種固定化環糊精葡萄糖苷轉移酶的應用，其特征在于，以固定化的環糊精葡萄糖苷轉移酶為催化劑，催化β-環糊精和L-抗壞血酸反應生產2-O-葡萄糖基抗壞血酸。
9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，催化反應體系為pH?6.0的磷酸鹽緩沖溶液；β-環糊精在反應體系中質量濃度為5％；L-抗壞血酸在反應體系中質量濃度為5％。
10.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，催化條件為45℃水浴鍋中避光避氧反應24h。
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