[發明專利]一種吸水鏈霉菌抗真菌活性物質的提取方法

有效

• 申請號: 201010294417.5
• 申請日: 2010-09-27
• 公開（公告）號: CN101979609A
• 公開（公告）日: 2011-02-23
• 發明（設計）人: 劉訓理;張楠;毛志泉;宋振;張本峰;于建;國輝;仇念全
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: C12P1/06
• 分類號: C12P1/06;B01D15/02;C12R1/55
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種吸水鏈霉菌抗真菌活性物質的提取方法，其特征在于包括以下步驟：

a、將斜面保存的吸水鏈霉菌BS-112轉接至PDA培養基平板上，于28～30℃培養72～96小時；將活化的菌種接入種子液培養基中，搖床培養；種子液培養條件為：溫度28～30℃，搖床轉速180～200轉/分，培養時間36～48小時；

b、將種子液接種至發酵培養基中，搖瓶發酵，發酵完成后將發酵液離心，收集上清液；發酵培養基為復合培養基，各組分及其質量濃度為：玉米粉1.0％～2.0％，葡萄糖1.5％～2.5％，蛋白胨1.5％～2.5％，MgSO₄0.5％～1.0％，KH₂PO₄0.5％～1.0％，其余為水；發酵條件為：溫度28～30℃，搖床轉速180～200轉/分，接種量(種子液體積與發酵液體積的百分比)為1％～3％，發酵時間84～96小時；

c、將大孔吸附樹脂與發酵液離心后的上清液按一定比例混合，在20～30℃下，轉速為100～120轉/分，振蕩吸附2～3小時；

d、將吸附后的樹脂收集裝入層析柱中，先用2～3倍樹脂柱體積的去離子水沖洗樹脂，再用解吸劑以流速0.8～1.2mL/min進行解吸，從色素帶流出開始收集解吸液，收集2.5～3.5倍樹脂柱體積后停止收集；

e、將收集的解吸液蒸發濃縮，冷凍干燥后所得到的干物即為抗真菌活性物質。

2.根據權利要求1所述的一種吸水鏈霉菌抗真菌活性物質的提取方法，其特征在于所說的c步驟中的大孔吸附樹脂為X-5樹脂。

3.根據權利要求1或2所述的一種吸水鏈霉菌抗真菌活性物質的提取方法，其特征在于所說的c步驟中大孔吸附樹脂X-5與發酵液離心后的上清液質量體積比為1∶25～1∶30。

4.根據權利要求1所述的一種吸水鏈霉菌抗真菌活性物質的提取方法，其特征在于所說的d步驟中的解吸劑為乙醇，乙醇的濃度為70％～80％。