[發明專利]一種利用木瓜蛋白酶酶解豬皮膠原蛋白制備的抗凍多肽

無效

• 申請號: 201010292036.3
• 申請日: 2010-09-26
• 公開（公告）號: CN101921317A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發明（設計）人: 汪少蕓;洪晶;饒平凡
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16;C12P21/06
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種抗凍多肽，其特征在于：所述多肽的氨基酸序列為Gly-Pro-Arg-Gly-Leu-Hyp-Gly-Glu-Arg-Gly-Arg-Hyp-Gly-Pro-Hyp-Gly。

2.一種如權利要求1所述的抗凍多肽的制備方法，其特征在于：以豬皮膠原蛋白為原料，采用木瓜蛋白酶對其進行酶解，分離純化、冷凍干燥得到抗凍多肽；酶解條件為：pH為7.0、溫度是37℃、酶解時間為30分鐘、酶-底物配比為1:10（w/w）；所述酶為木瓜蛋白酶；所述分離純化的具體步驟為：酶解產物首先利用Sephadex?G-50凝膠色譜進行分離，洗脫液為去離子水，流速為1?mL/min，洗脫峰在225nm下進行測量；收集具有最佳抗凍活性的峰，再用Sulfopropyl-Sepadex?C-25陽離子交換色譜進行分離，洗脫液為NaCl濃度梯度為0-0.5?M的0.01mol/L?pH7.0的磷酸緩沖液，流速為0.5mL/min；收集具有最佳抗凍活性的峰，利用RP-HPLC－C18反相高效液相色譜再進行進一步的分離，反相HPLC的分離條件是用10%-90%?（v/v）乙腈溶液梯度洗脫，流速為1mL/min，收集最具活性的峰，得到高純度的特異性抗凍多肽。