[發(fā)明專利]人成纖維細(xì)胞生長因子-21的聚乙二醇化學(xué)修飾物及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010291928.1
• 申請日: 2010-09-26
• 公開（公告）號: CN102406943A
• 公開（公告）日: 2012-04-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃志峰;李校堃;王會巖;王曉杰;馮文科;陸美斐;倪春燕;孫傳傳;葉朝輝
• 申請（專利權(quán)）人: 溫州醫(yī)學(xué)院;浙江格魯斯特生物科技有限公司
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61K38/18;A61P3/10
• 代理公司: 溫州甌越專利代理有限公司 33211
• 代理人: 李友福

1.一種人成纖維細(xì)胞生長因子-21的聚乙二醇化學(xué)修飾物，所述修飾物的活性是等摩爾量的未綴合的人成纖維細(xì)胞生長因子-21的活性的40%以上，優(yōu)選70%以上，更優(yōu)選80%以上。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人成纖維細(xì)胞生長因子-21的聚乙二醇化學(xué)修飾物，其特征在于是由人成纖維細(xì)胞生長因子-21與mPEG-馬來酰亞胺綴合而成的。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人成纖維細(xì)胞生長因子-21的聚乙二醇化學(xué)修飾物，其特征在于是由人成纖維細(xì)胞生長因子-21與mPEG-丁醛綴合而成的。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的人成纖維細(xì)胞生長因子-21的聚乙二醇化學(xué)修飾物，其特征在于：其中mPEG的分子量介于4kDa-22kDa，優(yōu)選為5kDa、10kDa、15kDa、或20kDa。

5.一種權(quán)利要求1所述的人成纖維細(xì)胞生長因子-21的聚乙二醇化學(xué)修飾物的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）FGF-21與mPEG-馬來酰亞胺或mPEG-丁醛混合，避光反應(yīng)后，終止反應(yīng)；

（2）將步驟（1）中的反應(yīng)產(chǎn)物過Sephedax?G-25柱除鹽，然后上樣于QAE-Sephadex?A50陰離子交換柱并用含200mM?NaCl的PB?緩沖液洗脫，收集洗脫峰；

上述所有步驟中，pH介于5.5~9.5，優(yōu)選為6、7、8、或9。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的人成纖維細(xì)胞生長因子-21的聚乙二醇化學(xué)修飾物的制備方法，其特征在于：其中FGF-21與mPEG-馬來酰亞胺或mPEG-丁醛的摩爾比介于1∶8?~?1∶65，優(yōu)選為1∶10、1∶20、1∶30、或1∶60。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的人成纖維細(xì)胞生長因子-21的聚乙二醇化學(xué)修飾物的制備方法，其特征在于還包括步驟：

??（3）用含500mM?NaCl的PB緩沖液洗脫步驟（2）中的QAE-Sephadex?A50陰離子交換柱，收集洗脫峰，得未修飾的FGF-21。

8.人成纖維細(xì)胞生長因子-21的聚乙二醇化學(xué)修飾物在制備用于調(diào)節(jié)糖、脂代謝的藥物中的應(yīng)用，優(yōu)選用于調(diào)節(jié)糖代謝的藥物是用于預(yù)防或治療Ⅱ型糖尿病的藥物。