[發明專利]計數并鑒別微生物的方法

無效

• 申請號: 201010288488.4
• 申請日: 2005-05-08
• 公開（公告）號: CN101921879A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發明（設計）人: 芭芭拉·揚;安德魯·塞奇
• 申請（專利權）人: 米利波爾公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12Q1/06;C12Q1/04
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 左路;林曉紅

1.一種用于檢測、計數和鑒別微生物的方法，其包括：(a)將液體樣品過濾通過適用于截留微生物的膜，(b)將膜用于擴增步驟，其中所述擴增步驟含有一或多種檢測劑，以及(c)檢測一或多種微生物的存在/不存在、所檢測到的微生物的數目以及類型。

2.權利要求1的方法，其中所述液體樣品是從50到1000毫升，所述膜選自具有由疏水分隔物所分隔的親水區域的PVDF膜，擴增步驟的時間為約30分鐘到約90分鐘，并用適用于所選定的檢測劑的裝置進行檢測。

3.權利要求1的方法，其中所述擴增是基于核酸的擴增體系，且所述檢測劑選自熒光標記的核酸、肽核酸探針和它們的混合物，并被數字成像系統所讀取。

4.權利要求1的方法，其中所述擴增是聚合酶鏈反應(PCR)形式的基于核酸的擴增體系，且所述檢測劑選自熒光標記的核酸、肽核酸探針和它們的混合物，并被數字成像系統所讀取。

5.權利要求1的方法，其中所述擴增是基于核酸的擴增體系，所述試劑選自DNA靶和RNA靶，且所述檢測劑選自由熒光標記的核酸、肽核酸探針和它們的混合物，并被數字成像系統所讀取。

6.權利要求1的方法，其中所述擴增是聚合酶鏈反應(PCR)形式的基于核酸的擴增體系，所述試劑選自DNA靶和RNA靶，且所述檢測劑選自熒光標記的核酸、肽核酸探針和它們的混合物，并被數字成像系統所讀取。

7.權利要求1的方法，其中用選自X射線膠片、對膜上的比色反應的觀察檢測、對熒光標記的觀察檢測的方法或用數字成像讀取所述檢測劑。

8.權利要求1的方法，其中所述擴增步驟選自聚合酶鏈反應(PCR)、基于核酸序列的擴增(NASBA)、鏈置換擴增(SDA)和聯動線性擴增(LLA)，且在熱循環儀或其他溫度控制裝置中將膜在從約室溫25℃到約90℃的溫度下孵育約30分鐘到約90分鐘。

9.權利要求6的方法，其中在擴增之前將膜孵育1到約4個小時。

10.權利要求1的方法，其中檢測劑是熒光標記。

11.權利要求1的方法，其中檢測劑是放射性標記。

12.權利要求1的方法，其中檢測劑是比色標記。

13.權利要求1的方法，其中檢測劑是酶標記。