[發(fā)明專利]一種檢測(cè)農(nóng)藥殘留的速測(cè)卡及其制備方法和應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010282911.X
• 申請(qǐng)日: 2010-09-16
• 公開（公告）號(hào): CN102399850A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 唐雪明;譚芙蓉;王利剛;趙凱;王金斌;吳瀟;朱宏;蔣玲曦;陶世如
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12Q1/44
• 分類號(hào): C12Q1/44
• 代理公司: 上海開祺知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31114
• 代理人: 費(fèi)開逵

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬食品安全領(lǐng)域，涉及一種檢測(cè)農(nóng)藥殘留的速測(cè)卡及其制備方法和應(yīng)用，具體涉及一種檢測(cè)農(nóng)藥殘留的速測(cè)卡及其制備方法，以及該速測(cè)卡在有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

近年來，食品安全問題已經(jīng)嚴(yán)重威脅著人類的健康，而果蔬中由于過量使用或?yàn)E用農(nóng)藥而導(dǎo)致的農(nóng)藥殘留及其急慢性中毒已經(jīng)引起了社會(huì)的高度重視。綠色和平組織于2008年12月和2009年2月在北京、上海和廣州的多家超市及農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)隨機(jī)選取了當(dāng)時(shí)當(dāng)季的常見水果蔬菜，對(duì)這些樣品上的農(nóng)藥殘留這些樣品上的農(nóng)藥殘留進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果顯示，不僅大多數(shù)蔬菜水果都有農(nóng)藥殘留，更為嚴(yán)重的是，45份樣品中竟然檢測(cè)出50種農(nóng)藥成分，數(shù)量之多讓人擔(dān)憂。同時(shí)混合農(nóng)藥殘留的情況非常嚴(yán)重。由于媒體的渲染，這一信息在消費(fèi)者中造成了一定的恐慌。2010年1月至2月初，海南豇豆“有毒”事件發(fā)生后，消費(fèi)者談豆色變。自2010年2月初武漢對(duì)海南豇豆發(fā)出禁令以來，合肥、南京、杭州等多個(gè)城市對(duì)檢測(cè)含有禁用農(nóng)藥水胺硫磷的豇豆采取銷毀處理。與此同時(shí)，農(nóng)藥殘留問題也給農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)和正常貿(mào)易帶來了許多負(fù)面影響。近年來，我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品因農(nóng)藥殘留超標(biāo)而被進(jìn)口國(guó)拒絕、扣留、退貨、索賠和中止合同的事件時(shí)有發(fā)生。如2002年上海出口到韓國(guó)的紫菘因農(nóng)藥殘留超標(biāo)問題而遭到退貨，造成直接經(jīng)濟(jì)損失達(dá)500多萬元。一些國(guó)家更是利用國(guó)際貿(mào)易技術(shù)壁壘，人為地對(duì)我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品出口設(shè)置障礙，使我國(guó)蔬菜出口屢屢受阻。

因此，如何快速、靈敏、準(zhǔn)確地檢測(cè)出農(nóng)產(chǎn)品及其加工產(chǎn)品中的殘留農(nóng)藥，是解決上述問題的關(guān)鍵。目前農(nóng)藥殘留檢測(cè)主要有兩大類方法：色譜檢測(cè)法和快速檢測(cè)法。色譜檢測(cè)法因?yàn)槠浔O(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的精確性和準(zhǔn)確性可為農(nóng)藥殘留執(zhí)法提供有力的參考依據(jù)。但其操作程序復(fù)雜、需要高技術(shù)專業(yè)檢測(cè)人員，檢測(cè)儀器和費(fèi)用都相當(dāng)昂貴，不利于大眾化。快速檢測(cè)法操作簡(jiǎn)便、不需要昂貴儀器，適合于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)及大批樣品的篩選檢測(cè)，主要用來防止有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留嚴(yán)重超標(biāo)的蔬菜和水果流入市場(chǎng)。快速檢測(cè)法中應(yīng)用最為廣泛的是酶抑制法：酶抑制法檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留是根據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥的毒理特性對(duì)酶分解底物的抑制作用而建立起來的；其中使用較多的是乙酰膽堿酯酶(簡(jiǎn)稱AChE)。

中國(guó)專利申請(qǐng)02159668.9公開了一種包括乙酰膽堿酯酶、保護(hù)劑、底物與顯色劑的試劑盒；中國(guó)專利申請(qǐng)200410053611.9公開了一種從人血清中提取乙酰膽堿酯酶酶片來檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的蔬菜農(nóng)藥殘留速測(cè)紙卡及其制備方法；中國(guó)專利申請(qǐng)200510090386.0公開一種用乙酰膽堿酯酶或丁酰膽堿酯酶之一來檢測(cè)有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)用液體酶試劑及其制備方法與使用方法。

應(yīng)用上述幾種試劑盒或測(cè)試卡在一定程度上解決了檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的問題，然而，它們均具有應(yīng)用的乙酰膽堿酯酶靈敏度不高，極易失活，推廣困難等缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種檢測(cè)農(nóng)藥殘留的速測(cè)卡及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明的檢測(cè)農(nóng)藥殘留的速測(cè)卡，其采用的酶是經(jīng)過分子進(jìn)化的家蠅乙酰膽堿酯酶，它具有比活性高、靈敏性好、穩(wěn)定性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，因而可快速簡(jiǎn)便地應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品、食品、土壤的檢測(cè)中，尤其是蔬菜、水果中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)中，特別是農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市、工廠及學(xué)校食堂的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)。

為了達(dá)到以上目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)。

所述的檢測(cè)農(nóng)藥殘留的速測(cè)卡，包括：蓋膜、第一塑料板、加樣孔、酶片、塑料膜、第二塑料板和底物片。其中，所述蓋膜粘貼于第一塑料板的表面上；所述第一塑料板的表面上設(shè)有至少兩個(gè)加樣孔，加樣孔的背面粘貼有固定了家蠅乙酰膽堿酯酶的酶片，所述酶片位置與加樣孔相對(duì)；所述第二塑料板上設(shè)有與所述酶片位置相對(duì)應(yīng)的粘貼有固定了乙酰靛酚的底物片；所述塑料膜置于第一、第二塑料板中間。

所述第一、第二塑料板面積相等。并且該塑料板也可以用例如卡片、硬紙板類物質(zhì)替換。

所述各加樣孔的間距為1-1.5cm。

所述酶片的直徑大于加樣孔的直徑。

所述底物片的直徑大于酶片的直徑。

所述速測(cè)卡的各器件均可使用明膠進(jìn)行粘貼。

所述的檢測(cè)農(nóng)藥殘留的速測(cè)卡的制備方法，包括以下步驟：

1.酶片的制備