[發明專利]一種檢測農藥殘留的速測卡及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 201010282911.X
• 申請日: 2010-09-16
• 公開（公告）號: CN102399850A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發明（設計）人: 唐雪明;譚芙蓉;王利剛;趙凱;王金斌;吳瀟;朱宏;蔣玲曦;陶世如
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院
• 主分類號: C12Q1/44
• 分類號: C12Q1/44
• 代理公司: 上海開祺知識產權代理有限公司 31114
• 代理人: 費開逵

1.一種檢測農藥殘留的速測卡，包括：蓋膜、第一塑料板、加樣孔、酶片、塑料膜、第二塑料板和底物片；其特征在于，所述蓋膜粘貼于第一塑料板的表面上；所述第一塑料板的表面上設有至少兩個加樣孔，加樣孔的背面粘貼有固定了家蠅乙酰膽堿酯酶的酶片，所述酶片位置與加樣孔相對；所述第二塑料板上設有與所述酶片位置相對應的粘貼有固定了乙酰靛酚的底物片；所述塑料膜置于第一、第二塑料板中間。

2.根據權利要求1所述的檢測農藥殘留的速測卡，其特征在于，所述第一、第二塑料板面積相等。

3.根據權利要求1所述的檢測農藥殘留的速測卡，其特征在于，所述各加樣孔的間距為1-1.5cm。

4.根據權利要求1所述的檢測農藥殘留的速測卡，其特征在于，所述酶片的直徑大于加樣孔的直徑。

5.根據權利要求1所述的檢測農藥殘留的速測卡，其特征在于，所述底物片的直徑大于酶片的直徑。

6.權利要求1所述的檢測農藥殘留的速測卡的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)酶片的制備：在0～4℃下，將乙酰膽堿酯酶、磷酸緩沖溶液、雙功能試劑戊二醛、牛血清蛋白混合，加入直徑稍小的醋酸纖維膜圓片，浸泡15～20min，然后取出，置于小型通風櫥中陰干，即為酶片；

2)底物片的制備：在0～4℃下，將乙酰靛酚溶入乙醇或丙酮中，溶液濃度為400～800mg/L，然后，將直徑稍大的醋酸纖維膜圓片放入該溶液中，浸泡15～20min，取出置于小型通風櫥中陰干，即為底物片；

3)速測卡的制備：將塑料板分別制成兩個面積相等的長方形；在第一塑料板上打至少兩個加樣孔，各孔間距為1～1.5cm；用明膠將上述酶片固定在該塑料板加樣孔的背面，將上述底物片固定在第二塑料板上與酶片相對應的位置；再在第一塑料板表面貼一層蓋膜，第一、第二塑料板中間貼一層塑料膜，即制得所述的檢測農藥殘留的速測卡。

7.根據權利要求6所述的檢測農藥殘留的速測卡的制備方法，其特征在于，步驟1)所述的乙酰膽堿酯酶是經過分子進化得到的基因工程酶。

8.根據權利要求6所述的檢測農藥殘留的速測卡的制備方法，其特征在于，步驟1)所述的乙酰膽堿酯酶與醋酸纖維膜的比例為3～5U/片。

9.根據權利要求6所述的檢測農藥殘留的速測卡的制備方法，其特征在于，步驟1)所述的雙功能團試劑戊二醛與醋酸纖維膜的比例為0.2～0.5ul/片。

10.根據權利要求6所述的檢測農藥殘留的速測卡的制備方法，其特征在于，步驟1)所述的牛血清蛋白與醋酸纖維膜的比例為1～3ul/片。

11.根據權利要求6所述的檢測農藥殘留的速測卡的制備方法，其特征在于，步驟2)所述的乙酰靛酚的固定量為5～10mg/片。

12.權利要求1所述的檢測農藥殘留的速測卡在有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留的快速檢測中的應用。