[發明專利]一種木質纖維分解復合菌群的制備方法及其用途

無效

• 申請號: 201010282162.0
• 申請日: 2010-09-15
• 公開（公告）號: CN101974426A
• 公開（公告）日: 2011-02-16
• 發明（設計）人: 寧平;周成;劉張;黃兆林;瞿廣非;熊向峰;鄧志華;黃凱;賈麗娟
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: C12N1/00
• 分類號: C12N1/00;C12N1/14;C05F11/08;C05F17/00;C12R1/645;C12R1/885;C12R1/845;C12R1/66
• 代理公司: 昆明今威專利代理有限公司 53115
• 代理人: 賽曉剛

技術領域

本發明涉及一種木質纖維分解復合菌群的制備方法及其用途，是一種利用微生物處理農業廢棄秸稈的生物技術。

技術背景

我國是個養牛大國，近年來，隨著養牛業向規模化、集約化方向發展，牛糞對環境的污染問題變得越來越嚴重。1999年中國農業統計年鑒表明，牛的飼養量為3506.94萬頭/年，每頭牛產糞量10.6噸/年、產尿量4.9噸/年；總產糞量13689.52萬噸/年，總產尿量4500.66萬噸/年。堆肥法對于性冷牛糞需要三四個月甚至半年，歷時長，處理效率低下，難以適應現代規模養殖業發展。傳統的牛糞堆的溫度也不高，難以殺滅牛糞中所含的大量雜草中子和蟲卵病菌等缺點限制了其使用價值。如何迅速而有效地處理牛糞是科技工作者面臨的新挑戰。

新鮮牛糞含水率都在80％以上，常常通過添加麥秸、稻殼等農作物秸稈進行調節。農業秸稈中較難降解的有機成分是木質素，其在堆肥化中的降解是促進堆肥化進程的關鍵。木質素的降解能為提高堆肥的效率、縮短堆肥時間改善堆肥質量的研究提供一條新的思路和技術。

在自然界中，能降解木質素并產生相應酶類的生物只占少數。降解木質素的真菌主要是白腐真菌，此類真菌能夠分泌胞外氧化酶降解木質素，因此被認為是最主要的木質素降解微生物。目前，國內外普遍采用的秸稈發酵技術如好氧發酵或厭氧發酵存在諸如菌種較單一，分解能力弱，纖維素總降解率低，一般為20～40％左右以及發酵周期較長，一般需要50d左右的發酵周期等問題。

發明內容

本發明的目的是提供一種木質纖維分解復合菌群的制備方法及其用途，為解決現有在秸稈降解過程中所利用的微生物菌劑種類單一、分解能力弱、纖維素總降解率低以及發酵周期長等問題，提供了一種高效秸稈分解復合菌群。

本發明的目的是這樣實現的：

本發明的木質纖維分解復合菌群的制備方法按照以下的步驟進行：

(1)牛糞培養基的制備：稱取牛糞150g加入1000mL的燒杯中，倒入400mL水，充分攪拌30min，過濾取掉渣制，取100mL加入250mL的三角瓶中待用；

(2)搖瓶培養接種劑制備：取牛糞堆肥150g投加到含400mL水的1000mL的燒杯中，充分攪拌30min，待用；

(3)取10mL搖瓶培養接種劑投加到100mL液體牛糞培養基的250mL三角瓶中，置于轉速為120r/min和溫度為45℃的搖床上培養3～5d；

(4)黃孢原毛平革菌(Phanerochaete?chrysosporium)和采用微生物分離的常規方法自牛糞上分離的木霉(Trichoderma?sp)、根霉(Rhizopus?sp)、花褶傘屬真菌(Panaeolus?sp)、鬼傘屬真菌(Coprinus?sp)的培養。將黃孢原毛平革菌(Phanerochaete?chrysosporium)和木霉(Trichodermasp)、根霉(Rhizopus?sp)、花褶傘屬真菌(Panaeolus?sp)、鬼傘屬真菌(Coprinus?sp)的菌種分別經過含PDA培養基的斜面培養，獲得其孢子，濃度為每毫升1×10⁵個孢子，其中PDA培養基：采用200g/L的馬鈴薯浸出液，然后添加20g/L的葡萄糖和17～20g/L的瓊脂并定溶至1L；

(5)將采用牛糞培養基的發酵獲得的發酵液與黃孢原毛平革菌(Phanerochaete?chrysosporium)和采用微生物分離的常規方法自牛糞上分離的木霉(Trichoderma?sp)、根霉(Rhizopus?sp)、花褶傘屬真菌(Panaeolus?sp)、鬼傘屬真菌(Coprinus?sp)的孢子懸液混合，幾種菌液的體積比為2∶1∶1∶1∶1∶1，然后干燥，獲得發酵菌劑。

本發明的木質纖維分解復合菌群的用途，是將該種微生物菌劑作為牛糞與農業秸稈的堆肥發酵菌劑。

本發明具有以下優點：1、能全面降解各種有機物質，尤其是秸稈和牛糞中的木質纖維素，降解率高，周期短，適宜條件下25天左右，降解率達60％以上；2、可實現農業廢棄物和畜禽糞便的有效利用，改良農業、養殖業生態環境，減少因焚燒秸稈造成的空氣污染和保護環境。

具體實施方式：

實施例1本發明的木質纖維分解復合菌群的制備方法：

按以下具體步驟制備：

(1)牛糞培養基的制備：稱取牛糞150g加入1000mL的燒杯中，倒入400mL水，充分攪拌30min，過濾取掉渣制，取100mL加入250mL的三角瓶中待用；