[發明專利]應用生物反應器工業化生產豬瘟活疫苗的方法有效
| 申請號： | 201010282143.8 | 申請日： | 2010-09-15 |
| 公開（公告）號： | CN102038944A | 公開（公告）日： | 2011-05-04 |
| 發明（設計）人： | 漆世華;劉漢平;秦紅剛;肖敏;溫文生;段振華;肖敏;王威;張萍 | 申請（專利權）人： | 武漢中博生物股份有限公司 |
| 主分類號： | A61K39/187 | 分類號： | A61K39/187;C12N7/00;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 武漢開元知識產權代理有限公司 42104 | 代理人： | 唐正玉 |
| 地址： | 430070 湖北省*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 應用 生物反應器 工業化 生產 豬瘟 疫苗 方法 | ||
1.應用生物反應器工業化生產豬瘟活疫苗的方法，其特征在于包括如下步驟：(1)將微載體和生物反應器經滅菌后，加入細胞生長液，接種制苗用細胞進行培養，待微載體上的細胞形成致密的單層，棄去細胞生長液，加入病毒維持液并接種豬瘟病毒，繼續培養使病毒繁殖；(2)接毒后18h，連續收獲病毒培養液于-15℃以下保存，合并病毒培養液加凍干保護劑制備豬瘟活疫苗。
2.根據權利要求1所述的應用生物反應器工業化生產豬瘟活疫苗的方法，其特征在于：病毒的接種量為培養體積的1～2％。
3.根據權利要求1所述的應用生物反應器工業化生產豬瘟活疫苗的方法，其特征在于：所述的生物反應器設定參數為：pH?6.5～7.8、溫度33～37℃、溶氧30～80％、攪拌速度30～100rpm。
4.根據權利要求1所述的應用生物反應器工業化生產豬瘟活疫苗的方法，其特征在于：所述的微載體為Cytodex系列微載體，微載體的使用密度為2～25g/L。
5.根據權利要求1所述的應用生物反應器工業化生產豬瘟活疫苗的方法，其特征在于：所述的制苗用細胞為SK6細胞、ST細胞或PK-15細胞。
6.根據權利要求1所述的應用生物反應器工業化生產豬瘟活疫苗的方法，其特征在于：所述的細胞生長液為含體積濃度為8～10％小牛血清的DMEM或DMEM/F12，病毒維持液為含體積濃度為1～2％小牛血清的DMEM或DMEM/F12。
7.根據權利要求1～6之一所述的應用生物反應器工業化生產豬瘟活疫苗的方法，其特征在于：所述的生物反應器容積為14～150L，或，制苗用細胞經過14L～40L或14L～40L～150L逐級放大培養后，于40L或150L生物反應器培養豬瘟病毒；或直接用14L、40L的生物反應器培養病毒。
8.根據權利要求1～6之一所述的應用生物反應器工業化生產豬瘟活疫苗的方法，其特征在于：所述生物反應器的培養采用批式、流加或灌注培養的方式，灌注的速率根據細胞的密度為每天0.5～5個工作體積。
9.根據權利要求1～6之一所述的應用生物反應器工業化生產豬瘟活疫苗的方法，其特征在于：所述的生物反應器為攪拌式生物反應器。
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