[發明專利]楊桃細菌性斑點病原細菌分子檢測引物及其檢測方法無效
| 申請號： | 201010275167.0 | 申請日： | 2010-09-08 |
| 公開（公告）號： | CN101935708A | 公開（公告）日： | 2011-01-05 |
| 發明（設計）人： | 陳慶河;翁啟勇;林靜;李本金;蘭成忠 | 申請（專利權）人： | 福建省農業科學院植物保護研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州元創專利商標代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡學俊 |
| 地址： | 350013 福*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 楊桃 細菌性 斑點 病原 細菌 分子 檢測 引物 及其 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種楊桃細菌性斑點病原細菌分子檢測引物，其特征在于：所述引物序列為：
上游引物 PSaveF:?5'----CTTATCGACGACTCAGCTGCG----3'
下游引物 PSaveR:?5'----TCATGCGTTGATCGTCAGGATC----3'。
2.一種利用權利要求1所述引物檢測楊桃細菌性斑點病菌的方法，包括：?
（1）采用酚、氯仿法從植物組織的葉片或果實中提取DNA；
（2）PCR擴增：以提取的DNA為模板進行PCR擴增；PCR反應體系25ul，包括2.5ul?10×PCR反應緩沖液，25mM?Mg2+?2ul，2.5mM?dNTPs?2ul,?0.5U?Taq?DNA聚合酶，10uM引物PSaveF?/?PSaveR各0.4ul和10ng模板DNA,?d.d.H2O補足25ul；PCR反應條件為:?95℃?預變性3min；?94℃變性?1min,?60℃退火?30?sec?,72℃延伸45?sec?共30個循環；72?℃延伸10?min；
（3）然后取PCR產物用瓊脂糖電泳分離，經溴化乙錠染色后于紫外燈下根據擴增產物的大小判定結果；
（4）如果能特異性地擴增出373bp產物，即能判斷所述的植物組織樣品中存在楊桃細菌性斑點病菌。
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