[發明專利]一株產鼠李糖脂生物表面活性劑菌株及其生產的菌劑

有效

• 申請號: 201010271627.2
• 申請日: 2010-09-03
• 公開（公告）號: CN101948793A
• 公開（公告）日: 2011-01-19
• 發明（設計）人: 洪青;王倩;蔣建東;李榮;李順鵬
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;B09C1/10;A62D3/02;C12R1/40;A62D101/20
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

1.一種產生鼠李糖脂類生物表面活性劑的菌株，該菌株KT2440-rhlABRI，是將銅綠假單胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)BSFD5中和鼠李糖脂類生物表面活性劑合成相關的基因簇rhlABRI，通過無標記同源重組的方法，整合到惡臭假單胞菌(Pseudomonas?putida)的模式菌株KT2440的染色體中而獲得，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期：2010.5.28，保藏編號：CGMCC?No.3875，分類命名：惡臭假單胞菌(Pseudomonas?putida)。

2.用權利要求1所述的菌株KT2440-rhlABRI生產的菌劑，是通過以下方法進行發酵生產而成的：

1)將菌株KT2440-rhlABRI接種于LB培養基搖瓶中，振蕩培養至對數期，LB培養基配方為：酵母粉5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl?10g/L，加水補足體積，pH值7.0-7.2。

2)將上述培養好的菌種按體積比10％的接種量接種入1000升種子罐，培養至對數生長期，種子罐所用的培養基配方為：NaNO₃2.5g/L，K₂HPO₄4.0g/L，KH₂PO₄4.0g/L，CaCl₂·2H₂O?0.1g/L，MgSO₄0.2g/L，NaCl?1.0g/L，KCl?1.0g/L，酵母粉1.0g/L，甘油30g/L，加水補足體積，pH值7.0-7.2。

3)將種子液按生產罐培養基的10％接種量接入生產罐培養，生產罐所用培養基與種子罐培養基相同；

4)在種子罐和生產罐的培養過程中無菌空氣的通氣量為2∶0.6-1.2，攪拌速度為240-300轉/分，培養溫度為30-32℃，全流程培養時間為80-100小時，發酵結束后菌體數量達到5億個/mL以上，發酵完成后培養液出罐直接用塑料包裝桶分裝。