[發(fā)明專利]一種楓楊高效組織培養(yǎng)繁殖方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010271552.8
• 申請(qǐng)日: 2010-09-01
• 公開（公告）號(hào): CN101999318A
• 公開（公告）日: 2011-04-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳錦懷;李文驊;張榮根;蔣澤平;韓杰鋒;黃源;文必秀;蔣鵬;陳泓宇;王煦輝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 揚(yáng)中市林蠶技術(shù)指導(dǎo)站;江蘇省林業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 南京縱橫知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32224
• 代理人: 董建林;嚴(yán)志平

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種植物組織培養(yǎng)繁殖方法，具體地說，是涉及一種楓楊的組織培養(yǎng)繁殖方法。

背景技術(shù)

楓楊是我國(guó)長(zhǎng)江中下游地區(qū)廣泛分布的一種重要鄉(xiāng)土樹種，其為胡桃科落葉喬木，樹枝具有片狀髓，裸芽外部有褐色毛，下部生有無柄的潛芽，具有羽狀復(fù)葉，葉的邊緣具有細(xì)鋸齒，其果實(shí)為近球形，具兩長(zhǎng)圓形或長(zhǎng)圓狀披針形的果翅，長(zhǎng)2厘米至3厘米，花期4月至5月，果熟期8月至9月，楓楊喜光，喜溫暖濕潤(rùn)的氣候，也較耐寒，對(duì)土壤要求不嚴(yán)，根深且主根明顯、側(cè)根發(fā)達(dá)，萌蘗性強(qiáng)，其木材色淺、質(zhì)輕、少翹裂、易于加工，可供家具、農(nóng)具、膠合板、纖維板、火柴盒、造紙等用材，同時(shí)，楓楊還是長(zhǎng)江中下游地區(qū)江河灘地興林滅螺及綜合開發(fā)的主要造林樹種之一，還廣泛栽植作園庭樹或行道樹。

傳統(tǒng)的楓楊采用種子播種繁殖、扦插、壓條繁殖，而上述方法中的種子播種繁殖速度非常慢，而由于楓楊生長(zhǎng)期有“傷流”，扦插、壓條的繁殖方式使得成活率很低，且獲得的種苗質(zhì)量參差不齊，由于選育的優(yōu)良種質(zhì)資源少，傳統(tǒng)方法很難在短期內(nèi)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)種苗。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種方法簡(jiǎn)單、繁殖速度快、種苗質(zhì)量好的楓楊高效組織培養(yǎng)繁殖方法。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：

一種楓楊高效組織培養(yǎng)繁殖方法，包括以下步驟：

(1)選材及消毒處理：采用經(jīng)選育的楓楊優(yōu)良單株根部萌發(fā)的10～20厘米長(zhǎng)萌條莖段為外植體，然后將選取的外植體剪切成2～4cm長(zhǎng)的小段，經(jīng)70％酒精消毒45秒，再用濃度為0.1％的升汞溶液消毒8～10分鐘，最后用無菌水沖洗3～5次；

(2)試管芽苗培養(yǎng)：在超凈的工作臺(tái)上及無菌條件下，將步驟(1)中消毒后的外植體剪去接觸消毒液的傷口，留1～2cm帶芽莖段接種在經(jīng)消毒的含有啟動(dòng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，然后將其置于普通日光燈為光源的環(huán)境下，其中光照強(qiáng)度為1000～1500lx，每日光照時(shí)間為16小時(shí)，溫度為22～25℃，濕度為50％～65％，培養(yǎng)45天，分化長(zhǎng)成試管芽苗；

(3)增殖培養(yǎng)：將從步驟(2)中長(zhǎng)成的試管芽苗，剪切帶有1～2個(gè)腋芽的節(jié)段或頂芽后，在超凈的工作臺(tái)上及無菌條件下，轉(zhuǎn)接于經(jīng)消毒的含有增殖培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，然后將其置于普通日光燈為光源的環(huán)境下，在光照強(qiáng)度為1000～1500lx，每日光照時(shí)間為16小時(shí)，溫度為22～25℃，濕度為50％～65％的條件下，對(duì)芽苗進(jìn)行增殖培養(yǎng)，使其不斷增殖，直至達(dá)到所需要的繁殖生產(chǎn)規(guī)模，如可達(dá)2000～3000瓶時(shí)進(jìn)入下一步驟；

(4)壯苗培養(yǎng)：將步驟(3)中增殖后的試管芽苗，剪切帶有1～2個(gè)腋芽的節(jié)段或頂芽后，在超凈的工作臺(tái)上及無菌條件下，接種于經(jīng)消毒的含有壯苗培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，在光照強(qiáng)度為1000～1500lx，每日光照時(shí)間為16小時(shí)，溫度為22～25℃，濕度為50％～65％的條件下，進(jìn)行壯苗培養(yǎng)，25天后進(jìn)入下一步驟；

(5)生根培養(yǎng)：將步驟(4)中經(jīng)過壯苗培養(yǎng)后的試管壯苗，去掉基部愈傷組織和部分葉片，留3～4片葉片，在超凈的工作臺(tái)上及無菌條件下，接種于經(jīng)消毒的含有生根處理產(chǎn)生根原基培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，在光照強(qiáng)度為1000～1500lx，每日光照時(shí)間為16小時(shí)，溫度為22～25℃，濕度為50％～65％的條件下，進(jìn)行生根培養(yǎng)6～10天；

(6)移栽、成活：將步驟(5)中經(jīng)生根培養(yǎng)的帶有根原基的無根小苗，取出清洗，移栽到含有泥炭和黃心土的基質(zhì)中，其中泥炭與黃心土的體積比為：3∶2，然后澆透水，保持溫度25～30℃，相對(duì)濕度85％以上，先遮光培養(yǎng)10天，后逐漸見光，20天后生根成活，在培養(yǎng)40～45天后，進(jìn)行全光照；

其中，所述的啟動(dòng)培養(yǎng)基為：每升基本培養(yǎng)基+0.05～0.2mg?N-苯基-N′-(2-氯-4-吡啶基)脲(4PU-30)+0.75～1.0mg?6-芐基嘌呤(6-BA)+0.02～0.1mg吲哚丁酸(IBA)；

所述的增殖培養(yǎng)基為：每升基本培養(yǎng)基+0.2～0.5mg噻苯隆(TDZ)+1.2～2.0mg?6-芐基嘌呤(6-BA)+0.04～0.1mg吲哚丁酸(IBA)+1000～2000mg活性炭(Charcoal)；

所述的壯苗培養(yǎng)基為：每升基本培養(yǎng)基+0.1～0.4mg噻苯隆(TDZ)+1.0～1.5mg?6-芐基嘌呤(6-BA)+0.08～0.2mg吲哚丁酸(IBA)+1000～2000mg活性炭(Charcoal)；