[發明專利]利用懸浮培養葡萄細胞生產13C標記反式白藜蘆醇的方法

無效

• 申請號: 201010268857.3
• 申請日: 2010-09-01
• 公開（公告）號: CN102382862A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發明（設計）人: 張衛;岳向國
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C12P7/22
• 分類號: C12P7/22
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

1.利用懸浮培養葡萄細胞生產¹³C標記反式白藜蘆醇的方法，其利用懸浮培養葡萄細胞經過誘導，添加吸附劑和添加¹³C標記前體產生¹³C標記反式白藜蘆醇，其特征在于：將葡萄細胞置于液體培養基中培養，細胞接種量為50～200g/L濕重，在細胞接種時每升培養基中加入50-200g的無菌吸附劑；在細胞指數生長初期，于每升培養基中加入濃度分別為5～1000μM的單一誘導劑或誘導劑組合，同時添加1～10mM¹³C標記前體；所述誘導劑為非生物誘導劑或真菌誘導子。

2.按照權利要求1所述方法，其特征在于：所述非生物誘導劑為硝酸銀、水楊酸或茉莉酸及其衍生物。

3.按照權利要求1所述方法，其特征在于：所述葡萄細胞的培養條件為：培養溫度為20～30℃，暗培養；培養周期為5～20天，每隔5～14天傳代一次。

4.按照權利要求1所述方法，其特征在于：所述細胞指數生長初期是指細胞接種于培養基后的第4～10天，即誘導劑的添加時間。

5.按照權利要求1所述方法，其特征在于：所述吸附劑為大孔吸附樹脂或對白藜蘆醇及其他植物酚類和黃酮類化合物有優良吸附作用的樹脂。

6.按照權利要求1所述方法，其特征在于：所述¹³C標記前體為¹³C標記苯丙氨酸或酪氨酸。

7.按照權利要求1所述方法，其特征在于：所述葡萄細胞的培養基組成為，于B5基礎培養基中添加0.1～1.0mg/Lα-萘乙酸，0.2～1mg/L激動素，0.2～2g/L酶解酪蛋白及10～60g/L蔗糖，pH值為5.5～6.5。