[發明專利]一種環氧水解酶基因、編碼蛋白及其應用

無效

• 申請號: 201010266947.9
• 申請日: 2010-08-27
• 公開（公告）號: CN102382847A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發明（設計）人: 范立強;賀婉紅;趙健;許建和
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C12N15/55
• 分類號: C12N15/55;C12N9/14;C12N15/63;C12N15/11;C12P41/00;C12P7/02;A01H5/00
• 代理公司: 上海翼勝專利商標事務所(普通合伙) 31218
• 代理人: 翟羽

1.一種編碼環氧水解酶的DNA分子，其序列滿足下述任一條件：

(1)SEQ?ID?NO：1所示核苷酸序列；

(2)在嚴格條件下與(1)限定的DNA序列雜交的DNA分子；

(3)由堿基簡并或/和替代衍生的與(1)所述核苷酸序列90％以上同源性，且與(1)編碼相同功能蛋白質的序列。

2.一種環氧水解酶，其氨基酸序列如(1)或(2)所示：

(1)SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列；

(2)在(1)限定的氨基酸序列中經過取代、缺失或/和疊加一個或幾個氨基酸衍生得到的，且與(1)編碼蛋白質具有相同功能的衍生蛋白質的氨基酸序列。

3.一種權利要求1所述的編碼環氧水解酶DNA分子的重組表達載體的構建方法，其特征在于，依據權利要求1所述的環氧水解酶基因的核苷酸序列和表達載體可用的多克隆位點，設計特異性引物，從cDNA模板中擴增目標基因，限制性酶切后與相應的表達載體連接，轉化、篩選得到重組表達質粒，轉化相應的宿主細胞，并在所述宿主細胞內表達，所述宿主細胞是原核細胞或真核細胞。

4.根據權利要求3所述的構建方法，其特征在于，所述原核細胞指大腸桿菌或枯草桿菌，所述真核細胞指酵母、昆蟲、哺乳動物或植物中的一種。

5.根據權利要求3所述的構建方法，其特征在于，所述特異性引物中含：

F：ATGGAAGAAATAGAGCACAG；

R：TCAGAACTTCTTGATCAA。

6.一種通過權利要求3所述的構建方法獲得的重組表達載體，其特征在于，含有權利1要求所述的DNA。

7.權利要求6所述的重組表達載體獲得的重組環氧水解酶在水解消旋環氧化物制備光學純手性中間體中的應用。

8.權利要求1所述的環氧水解酶的核苷酸序列或權利要求2所述的環氧水解酶的蛋白序列在植物生長、發育和抗逆中的應用。

9.一種探針分子，其特征在于，含有權利要求1所述DNA分子中10-100個連續核苷酸的互補序列。