[發明專利]基于納米微粒的生物標志物的化學發光檢測方法及應用無效
| 申請號： | 201010266812.2 | 申請日： | 2010-08-27 |
| 公開（公告）號： | CN102384905A | 公開（公告）日： | 2012-03-21 |
| 發明（設計）人： | 蔡圣;劉彩云;盧建忠 | 申請（專利權）人： | 復旦大學 |
| 主分類號： | G01N21/76 | 分類號： | G01N21/76;G01N33/577 |
| 代理公司： | 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吳桂琴 |
| 地址： | 20043*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 納米 微粒 生物 標志 化學 發光 檢測 方法 應用 | ||
1.基于納米微粒的生物標志物的化學發光檢測方法，其特征在于，使用聚苯乙烯96孔板作為載體結合包被抗體，與標準溶液或者生物樣本中的標志物結合后，加入適配體修飾的金納米微粒，形成三明治復合物，經NH2OH/HAuCl4放大后，進行化學發光定量測定，其包括步驟：
1)將包被抗體結合到聚苯乙烯96孔板上制備載體抗體復合物，封閉備用；
2)制備金納米微粒；
3)制備鏈霉親合素修飾的金納米微粒；
4)制備針對目標抗原適配體DNA修飾的金納米微粒；
5)NH2OH/HAuCl4放大后，加入魯米諾、AgNO3底物進行化學發光測定。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的標志物的一端與包被抗體結合，另一端與針對該標志物的適配體修飾的金納米微粒結合。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法中以適配體DNA識別抗原。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的適配體首先修飾至金納米微粒上，然后進行免疫反應。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的抗體為單克隆抗體，采用共價鍵固定至96孔板表面。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，該步驟結束后，標準樣品和生物樣本加入到96孔板上。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，該步驟結束后，以適配體修飾的金納米微粒加入到96孔板中。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，該步驟結束后，加入發光底物魯米諾和AgNO3，進行化學發光檢測；或，加入一定濃度的NH2OH/HAuCl4加入到96孔板中，進一步放大金納米微粒，隨后加入發光底物魯米諾和AgNO3，進行化學發光檢測。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述的金納米微粒放大步驟可采用1次以上。
10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生物樣本是血清、唾液、尿液或頭發。
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