[發(fā)明專利]一種澤瀉醇A的提純方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010263068.0
• 申請(qǐng)日: 2010-08-26
• 公開（公告）號(hào): CN102372759A
• 公開（公告）日: 2012-03-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李法慶;楊成東;劉東鋒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號(hào): C07J13/00
• 分類號(hào): C07J13/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種澤瀉醇A的提純方法，尤其是涉及一種用大孔樹脂富集和逆流色譜分離手段純化澤瀉醇A的方法。

背景技術(shù)：

澤瀉醇A，三萜類物質(zhì)。

分子式：C₃₀H₅₀O₅

理化性質(zhì)：無(wú)定形體，[α]23D+99.6°(氯仿)。溶于乙酸乙酯、丙酮、氯仿。微溶于甲醇、乙醇，不溶于水和石油醚。

實(shí)驗(yàn)證明，澤瀉醇A與含有1％膽固醇、2％膽酸鈉及0.2％氯化膽堿的食物同時(shí)喂養(yǎng)雄性大鼠時(shí)，十天后測(cè)量治療組和對(duì)照組血液中膽固醇含量，發(fā)現(xiàn)能明顯降低血液中膽固醇水平。澤瀉醇A可以用作治療肝炎，不易產(chǎn)生耐藥性性，而且毒副作用低，市場(chǎng)前景較好。

高速逆流色譜(high-speed?countercurrent?chromatography，HSCCC)是20世紀(jì)80年代發(fā)展起來(lái)的一種連續(xù)高效的液-液分配色譜分離技術(shù)，它不用任何固態(tài)的支撐物或載體。它利用兩相溶劑體系在高速旋轉(zhuǎn)的螺旋管內(nèi)建立起一種特殊的單向性流體動(dòng)力學(xué)平衡，當(dāng)其中一相作為固定相，另一相作為流動(dòng)相，在連續(xù)洗脫的過(guò)程中能保留大量固定相。

由于不需要固體支撐體，物質(zhì)的分離依據(jù)其在兩相中分配系數(shù)的不同而實(shí)現(xiàn)，因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等，不僅使樣品能夠全部回收，回收的樣品更能反映其本來(lái)的特性，特別適合于天然生物活性成分的分離。而且由于被分離物質(zhì)與液態(tài)固定相之間能夠充分接觸，使得樣品的制備量大大提高，是一種理想的制備分離手段。

它相對(duì)于傳統(tǒng)的固-液柱色譜技術(shù)，具有適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)。目前HSCCC技術(shù)正在發(fā)展成為一種備受關(guān)注的新型分離純化技術(shù)，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、食品和化妝品等領(lǐng)域，特別在天然產(chǎn)物行業(yè)中已被認(rèn)為是一種有效的新型分離技術(shù)；適合于中小分子類物質(zhì)的分離純化。

目前，提取澤瀉醇A的方法多是有機(jī)試劑提取或超臨界萃取，再大孔樹脂分離或硅膠柱分離。所得澤瀉醇A要么含量較低，要么成本較高、制備量小。

如專利(申請(qǐng)?zhí)?00810197317.3)“一種澤瀉三萜類化合物提取純化工藝”，該專利公開的方法是甲醇提取，提取液濃縮后乙酸乙酯萃取，萃取物乙醇溶解上大孔樹脂柱吸附，得總?cè)祁惢衔铩?/p>

再如專利(申請(qǐng)?zhí)?3124066.6)“澤瀉甾醇提取物及其制備方法、質(zhì)量控制方法”，該專利公開的方法是采用超臨界CO₂流體萃取澤瀉制得澤瀉總甾醇提取物。

還有專利“治療乙型肝炎的藥物組合物”，該專利公開的方法是乙醇回流提取，濃縮液氯仿萃取，硅膠柱分離，重結(jié)晶得針狀結(jié)晶澤瀉醇A。

文獻(xiàn)“草澤瀉三萜類化學(xué)成分的研究”，提供的方法是乙醇提取，石油醚、乙酸乙酯萃取，再硅膠柱分離得澤瀉醇各種單體。

文獻(xiàn)“大孔樹脂法純化澤瀉總萜醇類成分的實(shí)驗(yàn)研究”公開的是大孔樹脂對(duì)澤瀉醇的純化方法。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明要解決技術(shù)問(wèn)題是提供一種連續(xù)生產(chǎn)、處理大、含量高的澤瀉醇A的提純方法。

本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：

一種澤瀉醇A的提純方法，其特征在于包含以下步驟：

1)提取脫色：取澤瀉藥材粉碎40-80目，加入8-15倍量70-90％乙醇溶液，回流提取1-3小時(shí)，2-3次，合并提取液加活性炭脫色，濾過(guò)得脫色液；

2)大孔樹脂吸附：把上述提取液回收乙醇，再加適量水分散，保持溫度60-80℃加入大孔樹脂柱吸附，水醇梯度洗脫，收集有效成分洗脫液減壓回收乙醇，放置沉淀；

3)結(jié)晶：上述沉淀物濾出，加入5-8倍量35-40％乙醇溶液回流洗滌，冷卻常溫，過(guò)濾不溶物，用無(wú)水乙醇回流溶解結(jié)晶；

4)高速逆流色譜分離：把上述結(jié)晶物濾出，選用庚烷-二氯甲烷-乙腈的溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜儀分離，制得澤瀉醇A。

所述步驟1)中活性炭為針劑類藥用活性炭，用量為溶液量0.3-0.5％。

所述步驟2)中大孔樹脂型號(hào)可選D101、AB-8、HZ816或HPD-100中的一種，洗脫劑為10-20BV水→5-7BV20-40％乙醇溶液→5-8BV60-90％乙醇溶液。

所述步驟4)中溶劑比例為庚烷(8-13)∶二氯甲烷(2-5)∶乙腈(5-9)。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：