[發明專利]鐮刀菌BYB2及其在微生物發酵制備阿拉伯膠酶中的應用

有效

• 申請號: 201010259769.7
• 申請日: 2010-08-23
• 公開（公告）號: CN101993826A
• 公開（公告）日: 2011-03-30
• 發明（設計）人: 應國清;梅建鳳;廖青青;陳建澍;王鴻;易喻
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/24;C12P19/02;C12R1/77
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;冷紅梅

1.一株阿拉伯膠酶產生菌——鐮刀菌(Fusarium?sp.)BYB2，保藏于中國典型培養物保藏中心，地址：中國，武漢，武漢大學，430072，保藏編號：CCTCC?NO：M?2010087；保藏日期：2010年4月19日。

2.如權利要求1所述的鐮刀菌BYB2在微生物發酵制備阿拉伯膠酶中的應用。

3.如權利要求2所述的應用，其特征在于所述的應用為：將鐮刀菌BYB2菌種接種至以阿拉伯膠為唯一碳源的適用于鐮刀菌的液體產酶培養基中，25～35℃培養45～55h，獲得含有阿拉伯膠酶的發酵液。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述應用如下：

(1)將鐮刀菌BYB2菌種接種于斜面培養基，于25～30℃培養24～48h，得到活化后的鐮刀菌菌種；所述的斜面培養基終濃度組成為：馬鈴薯150～250g/L，蔗糖或葡萄糖15～25g/L，瓊脂18～22g/L，溶劑為水，pH?5～6；

(2)將步驟(1)活化培養后鐮刀菌BYB2孢子接種至液體種子培養基中，于25℃～35℃、150～250r/min振蕩條件下培養10～20h，得到種子液；所述液體種子培養基終濃度組成為：阿拉伯膠20～30g/L，酵母浸出粉3～10g/L，K₂HPO₄?0.5～1.5g/L，MgSO₄·7H₂O?0.5～1g/L，溶劑為水，pH?5.5～6.5；

(3)將步驟(2)種子液以1％～10％的體積比的接種量，移種到液體產酶培養基中，于25～35℃、150～250r/min振蕩條件下培養45～55h，得到含阿拉伯膠酶的發酵液；所述液體產酶培養基終濃度組成為：阿拉伯膠25～35g/L，(NH₄)₂SO₄?5～10g/L，K₂HPO₄?0.5～1.5g/L，MgSO₄·7H₂O?0.5～1g/L，KCl?0.5～1g/L，FeSO₄·7H₂O?0.01～0.03g/L，H₃BO₃?0.01～0.03g/L，pH?5.5～7；

(4)將步驟(3)含阿拉伯膠酶的發酵液經過濾或者離心，分離除去菌絲體，所得清液即為阿拉伯膠酶的粗酶液。

5.如權利要求1所述的鐮刀菌BYB2在水解阿拉伯膠制備L-阿拉伯糖中的應用。

6.如權利要求5所述的應用，其特征在于所述的應用為：以鐮刀菌BYB2經發酵培養獲得的阿拉伯膠酶為催化劑，以阿拉伯膠膠為反應底物，在pH?4～8的磷酸緩沖液中、于35～60℃下進行水解反應，制得所述L-阿拉伯糖。

7.如權利要求6所述的應用，其特征在于所述阿拉伯膠酶由如下方法獲得：將鐮刀菌BYB2菌種接種至以阿拉伯膠為唯一碳源的適用于鐮刀菌的液體產酶培養基中，25～35℃培養45～55h，獲得含有阿拉伯膠酶的發酵液。