[發明專利]一種新型組織特異性小環載體hIFNγ基因治療藥物無效
| 申請號: | 201010259342.7 | 申請日: | 2010-08-20 |
| 公開(公告)號: | CN102373232A | 公開(公告)日: | 2012-03-14 |
| 發明(設計)人: | 黃文林;左瑜芳;吳江雪 | 申請(專利權)人: | 黃文林;左瑜芳;吳江雪 |
| 主分類號: | C12N15/63 | 分類號: | C12N15/63;C12N15/23;A61K48/00;A61P35/00;A61P31/20 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 510060 *** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 新型 組織 特異性 小環 載體 hifn 基因治療 藥物 | ||
1.一種非病毒載體與治療基因的靶向性重組體,其特征在于,該重組體是通過應用基因克隆技術構建而成,由特異性啟動子啟動治療基因在EB病毒陽性組織中表達。
2.如權利要求1所述的重組體,其特征在于,該重組體的載體是非病毒質粒載體。
3.如權利要求2所述的重組體,其特征在于,該重組體的載體是小環DNA載體。
4.如權利要求3所述的重組體,其特征在于,該小環DNA重組體是由通過基因工程技術構建的母體質粒在宿主菌內以體內重組的方式產生的。
5.如權利要求1所述的重組體,其特征在于,該重組體的治療基因是具有抑制腫瘤作用的人IFNγ基因。
6.如權利要求1所述的重組體,其特征在于,該重組體的基因表達盒是由oriP啟動子-hIFNγ-多聚腺嘌呤核苷酸polyA構成的,其序列如下:
母環p2ФC31載體上的限制性內切酶位點SalI前一個堿基
-gtcgac6gtgaggatagcatatgctacccggatacagattaggatagcatatactacccagatatagattaggatagcatatgctaccgcagatatagattaggatagcctatgctacccagatataaattaggatagcatatactacccagatatagattaggatagcatatgctacccagatatagattaggatagcctatgctacccagatatagattaggatagcatatgctacccagatatagattaggatagcatatgctatccagatatttgggtagtatatgctacccagatataaattaggatagcatatcctcccttaatctctattaggatagcatatgctacccggatacagattaggatagcatatactacccagatatagattaggatagcatatgctacccagatatagattaggatagcttatgctacccagatataaattaggatagcatatactacccagatatagattaggatagcatatgctacccagatatagattaggatagcctatgctacccagatatagattaggatagcatatgctatccagatatttgggtagtatatgctacccatggcaacattagcccaccgtgctttcagcgacctcgtgaatatgaggaccaacaaccctgtgcttggcgctcaggcgcaagtgtgtgtaatttgtcctccagatcgcagcaatcgcgcccctatcttggcccgcccacctacttatgcaggtattccccgggtcgaggtaggcgtgtacggtgggaggcctatataagcagagctcgtttagtgaaccgtcagatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcctccgcggccccgaattggg898aagctt904atgaaatatacaagttatatcttggcttttcagctctgcatcgttttgggttctcttggctgttactgccaggacccatatgtaaaagaagcagaaaaccttaagaaatattttaatgcaggtcattcagatgtagcggataatggaactcttttcttaggcattttgaagaattggaaagaggagagtgacagaaaaataatgcagagccaaattgtctccttttacttcaaactttttaaaaactttaaagatgaccagagcatccaaaagagtgtggagaccatcaaggaagacatgaatgtcaagtttttcaatagcaacaaaaagaaacgagatgacttcgaaaagctgactaattattcggtaactgacttgaatgtccaacgcaaagcaatacatgaactcatccaagtgatggctgaactgtcgccagcagctaaaacagggaagcgaaaaaggagtcagatgctgtttcgaggtcgaagagcatcccagtaa1405gctagc1411ctgtgccttctagttgccagccatctgttgtttgcccctcccccgtgccttccttgaccctggaaggtgccactcccactgtcctttcctaataaaatgaggaaattgcatcgcattgtctgagtaggtgtcattctattctggggggtggggtggggcaggacagcaagggggaggattgggaagacaatagcaggcatgctggggatgcggtgggctctatgg1636actagt-母環p2ФC31載體上的限制性內切酶位點SpeI后一個堿基
其中:
1)1-6:限制性內切酶位點SalI
2)7-898:EB病毒特異性啟動子oriP
3)899-904:限制性內切酶位點HindIII
4)905-1405:人IFNγ基因編碼區
5)1406-1411:限制性內切酶位點NheI
6)1412-1636:多聚腺苷酸尾polyA
7)1637-1642:限制性內切酶位點SpeI
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