[發明專利]大豆耐低磷基因GmAPt的分子標記方法

有效

• 申請號: 201010258526.1
• 申請日: 2010-08-20
• 公開（公告）號: CN101921758A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發明（設計）人: 喻德躍;張丹;程浩
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

1.大豆耐低磷基因GmAPt的分子標記引物，其序列為，

Indel-SSR正向引物序列：CTTGAGATCACTACAACACACC

Indel-SSR正向引物序列：GATAGAAGAACAACACAAAAAC；

2.權利要求1所述引物用于鑒定大豆耐低磷基因GmAPt的分子標記方法，包括：

(1)大豆材料基因組DNA的提取；

(2)對大豆基因組DNA進行PCR擴增；

PCR擴增反應體系為：EXTaq×Master?PCR?Mix?5μL，3pmol/L?Primer2.0μL，15ng/μL模板DNA2μL，滅菌雙蒸水1μL；反應總量10μL.PCR反應在MJ?ResearchPTC-200熱循環儀上進行，反應程序包括：94℃預變性5min，每個循環95℃變性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共30個循環，最后72℃延伸7min，12℃保存；

(3)反應產物在質量比8％非變性聚丙烯酰胺凝膠上電泳，用硝酸銀染色，電泳結果如果有302bp的單條譜帶，則為含大豆耐低磷基因GmAPt的耐低磷材料；如果有312bp單條譜帶，則為不含大豆耐低磷基因GmAPt的大豆材料。