[發明專利]一種透明質酸的生物發酵提取方法

無效

• 申請號: 201010255232.3
• 申請日: 2010-08-13
• 公開（公告）號: CN101914594A
• 公開（公告）日: 2010-12-15
• 發明（設計）人: 張曉東;葉傳發
• 申請（專利權）人: 武漢嘉發膠原蛋白研究所
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12N13/00;C12N15/01;C08B37/08;C12R1/465
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.一種透明質酸生物發酵提取方法，其步驟是：

A、以鏈球菌為原菌株，以紫外線和亞硝基胍為誘變劑，對原菌株進行誘變，再通過對誘變株分離、初篩、復篩和性能檢測，得到生產性能好的生產菌株；

B、將菌株接種于瓊脂培養基上，培養斜面菌種；

C、取斜面菌種，接于1000ml的三角燒瓶中，三角燒瓶中以按水和原料的比例加入水500ml、葡萄糖0.5％、牛肉膏0.5％、蛋白胨1％、磷酸二氫鉀0.2％、硫酸鎂0.1％配制培養液，37℃培養13-17h，經檢查無雜菌污染，備用；

D、種子罐培養液，原料同步驟(C)，120℃滅菌30min，再冷卻37℃，將三角燒瓶菌種按種子罐培養液5％的比例接入，37℃培養13-17h，備用；

E、發酵罐培養液，原料同步驟(C)，120℃再依次滅菌、冷卻，將種子罐菌種按發酵罐培養液10％的比例接入，維持通氣量550L/min，37℃培養41-48h；

F、發酵液升溫至80℃恒溫滅活10min；

G、然后按發酵液重量的0.3％加入活性炭，吸附1h，過濾脫碳和除去菌體；

H、過濾液攪拌下加入1％的CPB水溶液，靜置收集沉淀，除去上清液；

I、沉淀加入發酵液體積的0.4mol/L的氯化鈉溶液，攪拌解離6h；

J、解離液通過離子交換脫色；

K、脫色液經膜分離濃縮和純化；

L、濃縮液加入三倍體積的95％乙醇，析出沉淀；

M、沉淀經干燥得透明質酸成品。

2.如權利要求1所述的一種透明質酸生物發酵的提取方法，其特征在于所述的鏈球菌為獸疫鏈球菌、馬鏈球菌、類馬鏈球菌。