[發明專利]一種溶藻弧菌菌株及其應用有效
| 申請號: | 201010254912.3 | 申請日: | 2010-08-17 |
| 公開(公告)號: | CN101993842A | 公開(公告)日: | 2011-03-30 |
| 發明(設計)人: | 宋曉玲;劉莉;黃倢;楊冰 | 申請(專利權)人: | 中國水產科學研究院黃海水產研究所 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;A23K1/16;C12R1/63 |
| 代理公司: | 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201 | 代理人: | 張中南 |
| 地址: | 266071 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 弧菌 菌株 及其 應用 | ||
1.溶藻弧菌(Vibrio?alginolyticus)SSL073菌株,保藏編號為:CCTCC?M2010193。
2.如權利要求1所述的溶藻弧菌SSL073菌株,其16s?rDNA堿基序列如SEQ?ID?NO:1所示。
3.權利要求1所述的溶藻弧菌SSL073菌株用于制備溶藻弧菌SSL073粉劑,制備步驟如下:從-80℃保存的菌種中挑取少量劃線于2216E固體培養基,在28℃培養24h獲得單菌落,取一單菌落接種于溶藻弧菌種子培養液中,28℃搖瓶培養24h獲得種子液,再把種子液接種于溶藻弧菌發酵液中發酵培養,發酵溫度控制在25-28℃;發酵液OD600值達到1.6時,終止發酵獲得發酵菌液;取發酵菌液進行離心濃縮20-50倍制得菌濁液;按菌濁液體積比1∶5-1∶10加入裂解液重懸菌體,37℃消化24小時;300w、10s/10s超聲波破碎20分鐘,破碎后的菌液噴霧干燥制成溶藻弧菌SSL073粉劑。
4.如權利要求3所述的制備溶藻弧菌SSL073粉劑,其特征在于上述的溶藻弧菌種子培養液成分質量百分比為:葡萄糖1.2%、蛋白胨1.0%、牛肉膏0.3%、酵母膏0.5%、檸檬酸三鈉0.8‰、K2HPO40.2‰、KH2PO40.1‰、MgSO40.4‰,pH為7.2。
5.如權利要求3所述的制備溶藻弧菌SSL073粉劑,其特征在于上述的溶藻弧菌發酵液成分質量百分比為:葡萄糖1.2%、蛋白胨0.2%、牛肉膏1.5%和NaCl?2.5%。
6.如權利要求3所述的制備溶藻弧菌SSL073粉劑,其特征在于上述的裂解液為:50mMTris-HCl,pH8.0;2mM?EDTA,100mM?NaCl,和0.1%Triton?X-100,加溶菌酶至100μg/ml。
7.權利要求3所述的溶藻弧菌SSL073粉劑,用于增強對蝦細胞和體液的免疫水平。
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