[發明專利]一種草莓莖尖組培專用培養基及其生產脫毒苗的方法

無效

• 申請號: 201010252871.4
• 申請日: 2010-08-13
• 公開（公告）號: CN101946702A
• 公開（公告）日: 2011-01-19
• 發明（設計）人: 陳懷勐;郭仰東;王立府;路河;高麗
• 申請（專利權）人: 北京金六環農業園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 史雙元

1.一種草莓莖尖組織初代培養基，其特征在于，該初代培養基是含有濃度為0.2～0.5mg/L的6-芐氨基嘌呤和濃度為0.1-0.2mg/L的萘乙酸的MS培養基。

2.根據權利要求1所述的草莓莖尖組織初代培養基，其特征在于，所述初代培養基中還包含0.02mg/L的赤霉素或/和0.3mg/L的激動素。

3.根據權利要求1所述的草莓莖尖組織初代培養基，其特征在于，所述初代培養基中0.1-0.2mg/L的萘乙酸用0.2mg/L的吲哚乙酸來代替。

4.一種草莓莖尖組織繼代培養基，其特征在于，該繼代培養基是含有濃度為0.2～0.5mg/L的6-芐氨基嘌呤的MS培養基。

5.根據權利要求4所述的草莓莖尖組織繼代培養基，其特征在于，所述繼代培養基中還包括0.2mg/L的吲哚乙酸。

6.一種草莓莖尖組織生根培養基，其特征在于，該生根培養基為1/2MS培養基。

7.根據權利要求6所述的草莓莖尖組織生根培養基，其特征在于，所述生根培養基還包含0.1～0.3mg/L的吲哚丁酸、0.5～1.0mg/L的吲哚乙酸或0.01～0.1mg/L的萘乙酸。

8.一種草莓莖尖組織培養生產脫毒苗的方法，其特征在于，包括以下操作步驟：

(1)熱處理：將無病健壯的日本紅顏草莓苗放入人工氣候箱中，一天中16小時在40～41℃、有光照的條件下處理，其余18小時在35℃、黑暗條件下處理，持續變溫處理4-5周；

(2)材料的采集及消毒：取步驟(1)熱處理后的草莓苗匍匐莖頂芽，進行滅菌消毒處理；

(3)莖尖初代培養：在解剖鏡下從滅菌消毒后的頂芽上切取0.2-0.5mm大小的莖尖生長點，接種到上述的初代培養基上中，暗培養5-7天后，光照培養35-45天至分化出叢生芽，其中，光照強度為1500-2000lx，光照時間為10h/d，溫度25±2℃；

(4)繼代培養：將初代培養分化出來的叢生芽轉接到上述繼代培養基中培養25-35天，光照強度為2000-3000lx，光照時間為14h/d，溫度25±2℃，繼代培養代數控制在5-8代；

(5)生根培養：將經繼代培養的草莓苗轉到上述生根培養基中促使其生根，生根培養20-35天；

(6)草莓苗的馴化及移栽：將生根培養后的瓶栽草莓苗置于待生長條件下煉苗7-10天，移栽時開蓋鍛煉1-2d，然后將其移栽至含有基質的營養缽中。

9.根據權利要求8所述的草莓莖尖組織培養生產脫毒苗的方法，其特征在于，所述移栽具體為：將生根培養后的瓶栽草莓苗置于待生長條件下煉苗7-10天，移栽時開蓋鍛煉1-2d，然后把草莓苗取出，用水沖掉培養基，用1000倍百菌清浸泡5min后扦插到8×8營養缽中，所用基質為袋裝富養基質，扦插完畢后覆膜保濕7-10天，保持相對濕度80％以上，溫度30℃以上加蓋遮陽網，7-10天后逐步撤膜。

10.根據權利要求8所述的草莓莖尖組織培養生產脫毒苗的方法，其特征在于，步驟(4)中繼代培養達到第5代后使用的繼代培養基中硝酸銨濃度降為原濃度的1/2-1/4。