[發(fā)明專利]地黃葉總苷膠囊劑的檢測方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010251405.4
• 申請(qǐng)日: 2010-08-09
• 公開（公告）號(hào): CN101940655A
• 公開（公告）日: 2011-01-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張孝齊;邊寶林;楊健
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川美大康藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): A61K36/804
• 分類號(hào): A61K36/804;A61K9/48;G01N30/90;G01N21/78;G01N30/02;G01N21/33;A61P13/12;A61K127/00
• 代理公司: 成都蓉信三星專利事務(wù)所 51106
• 代理人: 劉克勤

1.一種地黃葉總苷膠囊劑的檢測方法，所述地黃葉總苷膠囊劑由地黃葉總苷75g和適當(dāng)輔料制備而成，該檢測方法含性狀、檢查、鑒別和含量測定項(xiàng)目；其特征在于：所述鑒別是對(duì)該膠囊中所含地黃葉總苷和毛蕊花糖苷的成分鑒別，所述含量測定是對(duì)該膠囊中所含地黃葉總苷和毛蕊花糖苷的含量測定的方法：

地黃葉總苷的成分鑒別是以三氯化鐵乙醇溶液為鑒別劑的鑒別方法；

毛蕊花糖苷的成分鑒別是以對(duì)照品毛蕊花糖苷為對(duì)照，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝7∶3∶0.5為展開劑的薄層色譜法；

地黃葉總苷的含量測定是以對(duì)照品毛蕊花糖苷為對(duì)照，采用分光光度法測定；

毛蕊花糖苷的含量測定是以對(duì)照品毛蕊花糖苷為對(duì)照，以甲醇∶冰醋酸∶水＝33∶1∶66為流動(dòng)相，采用高效液相色譜法測定。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述地黃葉總苷膠囊劑的檢測方法，其特征在于：

所述檢測方法包括以下：

(1)地黃葉總苷的成分鑒別：

取本品內(nèi)容物，研細(xì)，加甲醇，振搖使溶解，濾過，取濾液，加9％三氯化鐵乙醇溶液，即顯墨綠色；

(2)毛蕊花糖苷的成分鑒別：

取本品內(nèi)容物，研細(xì)，加甲醇，振搖使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。另取毛蕊花糖苷對(duì)照品加甲醇制成對(duì)照品溶液，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝7∶3∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以9％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；

(3)地黃葉總苷的含量測定：

取毛蕊花糖苷對(duì)照品，精密稱定，置量瓶中，加甲醇∶冰醋酸∶水＝33∶1∶66，混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液；精密量取對(duì)照溶液五份，分別置量瓶中，用上述混合溶劑稀釋至刻度，搖勻，以相應(yīng)試劑為空白，用紫外-可見分光光度法，測定吸光度，以吸光度值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；取本品內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，精密稱取，置量瓶中，加入甲醇∶冰醋酸∶水＝33∶1∶66混合溶液，超聲處理，放冷，加上述混合溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液，置量瓶中，加上述混合溶劑稀釋至刻度，搖勻，以相應(yīng)試劑為空白，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中毛蕊花糖苷的含量，即得，本品每粒含地黃葉總苷以毛蕊花糖苷計(jì)，應(yīng)在37.5mg～54.0mg之間；

(4)毛蕊花糖苷的含量測定：

以十八烷基硅烷鍵和硅膠為填料，以甲醇∶冰醋酸∶水＝33∶1∶66為流動(dòng)相，流速為1ml/min，檢測波長為330nm，理論板數(shù)按毛蕊花糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于8500；取毛蕊花糖苷對(duì)照品，精密稱定，置量瓶中，加甲醇∶冰醋酸∶水＝33∶1∶66混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取上述溶液，置量瓶中，用流動(dòng)相甲醇∶冰醋酸∶水＝33∶1∶66混合溶劑稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液；取本品內(nèi)容物，混勻，研細(xì)，精密稱取，置量瓶中，加流動(dòng)相，超聲處理，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液，置量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得毛蕊花糖苷的含量，本品每粒含毛蕊花糖苷應(yīng)在18.0mg～25.0mg之間。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述地黃葉總苷膠囊劑的檢測方法，其特征在于：

更具體的檢測方法包括以下：

(1)地黃葉總苷的成分鑒別：

取本品內(nèi)容物40mg，研細(xì)，加甲醇5ml，振搖使溶解，濾過，取濾液1ml，加9％三氯化鐵乙醇溶液2～3滴，即顯墨綠色；

(2)毛蕊花糖苷的成分鑒別：

取本品內(nèi)容物20mg，研細(xì)，加甲醇2ml，振搖使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。另取毛蕊花糖苷對(duì)照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝7∶3∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以9％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；

(3)地黃葉總苷的含量測定：

取毛蕊花糖苷對(duì)照品約8mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇∶冰醋酸∶水＝33∶1∶66，混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每1ml含毛蕊花糖苷約0.16mg對(duì)照品溶液；精密量取對(duì)照溶液1.0、3.0、5.0、7.0、9.0ml，分別置50ml量瓶中，用上述混合溶劑稀釋至刻度，搖勻，以相應(yīng)試劑為空白，用紫外-可見分光光度法，在330nm的波長處測定吸光度，以吸光度值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；取本品內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，精密稱取約0.18g，置50ml量瓶中，加入甲醇∶冰醋酸∶水＝33∶1∶66混合溶液45ml，超聲處理25分鐘，放冷，加上述混合溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液1ml，置50ml量瓶中，加上述混合溶液稀釋至刻度，搖勻，以相應(yīng)試劑為空白，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中毛蕊花糖苷的含量，即得，本品每粒含地黃葉總苷以毛蕊花糖苷計(jì)，應(yīng)在37.5mg～54.0mg之間；

(4)毛蕊花糖苷的含量測定：

以十八烷基硅烷鍵和硅膠為填料，以甲醇∶冰醋酸∶水＝33∶1∶66為流動(dòng)相，流速為1ml/min，檢測波長為330nm，理論板數(shù)按毛蕊花糖苷峰計(jì)算應(yīng)不低于8500；取毛蕊花糖苷對(duì)照品約8mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇∶冰醋酸∶水＝33∶1∶66混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取上述溶液2ml，置10ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得每1ml含毛蕊花糖苷約0.032mg對(duì)照品溶液；取本品內(nèi)容物，混勻，研細(xì)，精密稱取約0.18g，量50ml量瓶中，加流動(dòng)相45ml，超聲處理25分鐘，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液個(gè)10μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得毛蕊花糖苷的含量，本品每粒含毛蕊花糖苷應(yīng)在18.0mg～25.0mg之間。