[發明專利]芍杞顆粒劑的檢測方法

有效

• 申請號: 201010251401.6
• 申請日: 2010-08-09
• 公開（公告）號: CN101926889A
• 公開（公告）日: 2010-12-29
• 發明（設計）人: 李彥;朱培庭;陶建生;張彤;耿炤
• 申請（專利權）人: 四川美大康藥業股份有限公司
• 主分類號: A61K36/815
• 分類號: A61K36/815;G01N30/90;G01N30/02;A61P1/16
• 代理公司: 成都蓉信三星專利事務所 51106
• 代理人: 劉克勤

1.一種芍杞顆粒劑的檢測方法，所述芍杞顆粒制劑由白芍750.0g陳皮562.5g制何首烏375.0g枸杞子375.0g炙甘草187.5g和適當輔料制備而成；該檢測方法包括性狀、檢查、鑒別及含量測定項目；其特征在于：

所述鑒別是對該制劑中陳皮的薄層鑒別，制何首烏的薄層鑒別，枸杞子的薄層鑒別，炙甘草中所含甘草酸銨的薄層鑒別；所述含量測定是對制劑中白芍所含芍藥苷的含量測定；

陳皮的鑒別是以對照藥材陳皮和對照品橙皮苷為對照品，并分別以乙酸乙酯∶甲酸∶水＝100∶17∶13和甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸∶水＝20∶10∶1∶1為展開劑的二次展開的薄層色譜鑒別；

制何首烏的鑒別是以對照藥材何首烏和對照品大黃素為對照品，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝15∶2∶1為展開劑的薄層色譜鑒別；

枸杞子的鑒別是以對照藥材枸杞子為對照品，以石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝10∶7∶0.5為展開劑的薄層色譜鑒別；

炙甘草的鑒別是以對照品甘草酸銨為對照，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝6∶1∶3為展開劑的薄層色譜鑒別；

芍藥苷的含量測定是以對照品芍藥苷為對照，以甲醇∶0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液∶醋酸∶異丙醇＝67∶173∶4∶4為流動相的高效液相色譜法。

2.根據權利要求1所述芍杞顆粒劑的檢測方法，其特征在于：

所述檢測方法包括以下項目：

(1).陳皮的薄層鑒別

取本品適量，研細，加甲醇，超聲處理，濾過，濾液蒸至近干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對照藥材，同法制成對照藥材溶液；再取橙皮苷對照品，加適量甲醇制成對照品溶液；吸取上述三種溶液，分別點于同一用氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲醇∶水＝100∶17∶13為展開劑，展開，取出，晾干，再以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸∶水＝20∶10∶1∶1的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；

(2).制何首烏的薄層鑒別

取本品適量，研細，加甲醇，超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘渣用三氯甲烷洗滌數次，至三氯甲烷近無色，合并三氯甲烷洗液，濃縮，作為供試品溶液；另取何首烏對照藥材，同法制成對照藥材溶液；再取大黃素對照品，加適量甲醇制成對照品溶液；吸取上述三種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝15∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

(3).枸杞子的薄層鑒別

取本品適量，研細，加甲醇，超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘渣加水使溶解，用乙酸乙酯提取，合并提取液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材，加水，煮沸，濾過，濾液同法制成對照藥材溶液；吸取上述兩種溶液，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝10∶7∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相同位置上，顯相同顏色的熒光斑點；

(4).炙甘草的薄層鑒別

取本品，研細，加乙醇，超聲處理，濾過，濾液蒸干，加水使溶解，轉移至離心管中，再加稀鹽酸，超聲處理，靜置，離心，取沉淀物，加稀乙醇使溶解，用碳酸氫鈉溶液調節pH至中性，離心，取上清液，作為供試品溶液；另取甘草酸銨對照品，加稀乙醇制成對照品溶液，吸取上述兩種溶液，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝6∶1∶3上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

(5).芍藥苷的含量測定

以十八烷基硅烷鍵和硅膠為填充劑，以甲醇∶0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液∶醋酸∶異丙醇＝67∶173∶4∶4為流動相，檢測波長為230nm，理論板數按芍藥苷峰計算應不低于2000；精密稱取芍藥苷對照品適量，加甲醇制成對照品溶液；取本品，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得，本品每袋含白芍以芍藥苷計，不得少于48.0mg；

3.根據權利要求2所述芍杞顆粒劑的檢測方法，其特征在于：

更具體的檢測方法包括：

(1).陳皮的薄層鑒別

取本品適量，研細，取3g，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸至近干，殘渣加甲醇3ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液；再取橙皮苷對照品，加適量甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；吸取上述三種溶液各5ul，分別點于同一用0.5％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲醇∶水＝100∶17∶13為展開劑，展至約3cm，取出，晾干，再以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸∶水＝20∶10∶1∶1的上層溶液為展開劑，展至約8cm，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；

(2).制何首烏的薄層鑒別

取本品適量，研細，取10g，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣用三氯甲烷洗滌數次，至三氯甲烷近無色，合并三氯甲烷洗液，濃縮至約1ml，作為供試品溶液；另取何首烏對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；再取大黃素對照品，加適量甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液，吸取上述三種溶液各5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸＝15∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；

(3).枸杞子的薄層鑒別

取本品適量，研細，取0.5g，加甲醇10ml，超聲處理5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，用乙酸乙酯提取兩次，每次10ml，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材1g，加水30ml，煮沸15分鐘，濾過，濾液同法制成對照藥材溶液；吸取上述兩種溶液各2～3ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以沸點60～90℃的石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝10∶7∶0.5為展開劑，展開(30～35℃，預先飽和20分鐘)，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相同位置上，顯相同顏色的熒光斑點；

(4).炙甘草的薄層鑒別

取本品5g，研細，加乙醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，加水20ml使溶解，轉移至離心管中，再加稀鹽酸5ml，超聲5分鐘，靜置，離心，取沉淀物，加稀乙醇1ml使溶解，用10％碳酸氫鈉溶液調節pH至中性，離心，取上清液，作為供試品溶液；另取甘草酸銨對照品，加稀乙醇制成每1ml含有1mg的溶液，作為對照品溶液，吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF₂₅₄薄層板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝6∶1∶3上層溶液為展開劑，展開，取出晾干，置254nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

(5).芍藥苷的含量測定

以十八烷基硅烷鍵和硅膠為填充劑，以甲醇∶0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液∶醋酸∶異丙醇＝67∶173∶4∶4為流動相，檢測波長為230nm，理論板數按芍藥苷峰計算應不低于2000；精密稱取芍藥苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的對照品溶液；取本品，研細，取約0.2g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率135W及頻率59kHz超聲處理30分鐘，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得，本品每袋含白芍以芍藥苷計，不得少于48.0mg。