[發明專利]禽流感和傳染性囊病混合病毒樣顆粒、制備方法和應用

無效

• 申請號: 201010248671.1
• 申請日: 2010-08-09
• 公開（公告）號: CN102373182A
• 公開（公告）日: 2012-03-14
• 發明（設計）人: 曹永長;劉大才;薛春宜
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C12N7/04
• 分類號: C12N7/04;C12N15/866;A61K39/295;A61P31/16;A61P31/14;A61K39/145;A61K39/12
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫

技術領域

本發明涉及禽流感和傳染性囊病混合病毒樣顆粒，及其制備和應用。

背景技術

禽流感(Avian?Influenza，AI)是由正黏病毒科A型流感病毒引起的禽類(家禽和野禽)的一種感染和/或疾病綜合征，發生在雞、鴨、鵝、鴿子等禽類和鳥類身上，但主要侵害火雞和雞，哺乳動物如豬、馬、海豹、人等也可感染。根據禽流感病毒(Avian?Influenza?Virus，AIV)株的致病性、禽的種類、環境、飼養管理條件以及并發疾病等因素，感染后的禽只表現為無癥狀感染、輕度的上呼吸道癥狀、產蛋量下降到急性的致病性死亡等多種形式，直接影響雞體的健康及其產品質量，是現代化養禽業難以對付的重要禽類呼吸道傳染病之一，與馬立克氏病、傳染性法氏囊病、白血病、網狀內皮增生癥等一樣，也是嚴重威脅家禽的重要免疫抑制病。被世界動物衛生組織列為A類動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。

自從1955年證實了1878年意大利暴發的雞瘟是由A型流感病毒引起的流感以來到2001年，全球共報道了19起高致病性禽流感疫情，其中火雞發生5起，雞14起。進入本世紀以來，高致病性禽流感疫情也不斷發生。2001年中國香港發生H5N1亞型流感；2003年初，歐洲大陸相繼暴發禽流感，2003年2月荷蘭發生H7N7亞型、2003年4月比利時發生H7N7亞型、2003年5月德國發生H7N7亞型禽流感。2003年末2004年初，亞洲各國相繼暴發禽流感，疫情共涉及10個國家或地區。2003年12月，韓國發生禽流感，2004年1月，日本、越南、臺灣、泰國、柬埔賽、印度尼西亞、巴基斯坦、老撾和中國等國家和地區先后發生禽流感，其中日本、臺灣發生了H5N2亞型禽流感，其他國家和地區發生了H5N1亞型禽流感。這些疫情的暴發，不但給亞洲各國養禽業造成毀滅性打擊，而且嚴重影響到人民的身體健康，越南、泰國等國家先后發生了禽流感感染人類，造成死亡的嚴重后果。2004年2月，禽流感又在美洲大陸發生，其中美國發生了H7N7禽流感，4月份加拿大也發生了禽流感。目前，高致病性禽流感特別是H5N1禽流感還在亞洲和北美部分國家和地區蔓延。

我國目前流行的高致病性禽流感主要是H5N1亞型禽流感。目前國內生產的用于預防禽流感的疫苗大部份是采用傳統的雞胚法培養增殖活病毒，經化學試劑滅活后生產成疫苗。這種技術又分為兩類不同的制備法：一是直接用野生型病毒感染雞胚制備，另一類是先采用反向遺傳技術改造野生病毒的遺傳性，然后用“拯救”改造的新病毒來感染雞胚，增殖病毒，生產疫苗。

這些流感疫苗制備技術有其優點，但亦存在著很大的缺陷。尤其是流感感毒的與眾不同特性，例如：高頻率突變，雙重及多重亞型病毒之間遺傳物質重組及抗原漂移等——使這些疫苗的長期安全性及有效性受到了極大挑戰，甚至產生了“無效疫苗”，難以應付新的突變型流感病毒的傳染。除此以外，這些疫苗制劑還存在著以下不足：(1)生產周期長：從獲得新的亞型病毒株到疫苗生產上市，耗時5-8個月，難以遏制新的疫情大爆發。(2)生產條件高：為預防人為的污染環境及生產的活病毒的泄漏擴散，整套生產必須按規定在生物安全三級實驗室條件下進行，病毒的滅活必須保證完全，徹底。(3)無法區別被免疫過的雞只與受病毒感染的雞只。

傳染性囊病病毒(IBDV)屬于雙RNA病毒科(Birnaviridae)禽雙RNA病毒屬(Avibirnavirus)，它是雞傳染性囊病的病原。目前普遍認為IBDV具有4種成熟蛋白質：VP1、VP2、VP3和VP4，分子量分別為90kDa、37-40kDa、32-35kDa和24-30kDa。其中VP2和VP3是主要的結構蛋白，分別占病毒總蛋白的51％和40％。VP2分子量約為40kDa，它含有血清型特異性的能誘導中和抗體的抗原決定簇，是病毒的主要宿主保護性免疫原(Hudson?et?al，1986)。