[發明專利]禽流感和傳染性囊病混合病毒樣顆粒、制備方法和應用無效
| 申請號: | 201010248671.1 | 申請日: | 2010-08-09 |
| 公開(公告)號: | CN102373182A | 公開(公告)日: | 2012-03-14 |
| 發明(設計)人: | 曹永長;劉大才;薛春宜 | 申請(專利權)人: | 中山大學 |
| 主分類號: | C12N7/04 | 分類號: | C12N7/04;C12N15/866;A61K39/295;A61P31/16;A61P31/14;A61K39/145;A61K39/12 |
| 代理公司: | 廣州三環專利代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝傳鑫 |
| 地址: | 510275 *** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 禽流感 傳染性 混合 病毒 顆粒 制備 方法 應用 | ||
1.混合病毒樣顆粒,其特征在于,包含:
流感病毒的基質蛋白M1;
流感病毒的表面抗原紅細胞凝集素HA;
一個融合膜蛋白,其包含傳染性囊病病毒VP2蛋白的主要抗原表位的膜外域,流感病毒的紅細胞凝集素HA的跨膜區和膜內區;所述傳染性囊病病毒VP2蛋白的主要表面抗原的膜外域替換流感病毒的紅細胞凝集素HA的5’端的大致相同長度的膜外域;
在所述混合病毒樣顆粒的表面上同時表達流感病毒的表面抗原紅細胞凝集素HA和傳染性囊病病毒的表面抗原VP2蛋白。
2.如權利要求1所述的混合病毒樣顆粒,其中所述混合病毒樣顆粒還含有流感病毒的神經氨酸苷酶NA。
3.如權利要求1或2所述的混合病毒樣顆粒,其中所述混合病毒樣顆粒還含有流感病毒的核蛋白NP。
4.如權利要求1所述的混合病毒樣顆粒,其中融合膜蛋白的序列如SEQ?ID?NO:10所示。
5.禽流感和傳染性囊病二價疫苗,其特征在于,包含如權利要求1-4所述的混合病毒樣顆粒和佐劑。
6.制備混合病毒樣顆粒的方法,其特征在于,所述方法包含以下步驟:
構建昆蟲桿狀病毒表達載體,其表達載體含有流感病毒的基質蛋白M1,流感病毒的表面抗原紅細胞凝集素HA,或一個融合膜蛋白,其包含傳染性囊病病毒VP2蛋白的主要抗原表位的膜外域,流感病毒的紅細胞凝集素HA的跨膜區和膜內區;所述含傳染性囊病病毒VP2蛋白的主要表面抗原的膜外域替換流感病毒的紅細胞凝集素HA的5’端的大致相同長度的膜外域;
用所述構建的昆蟲桿狀病毒表達載體按比例同時感染昆蟲細胞,包裝出混合病毒樣顆粒,其表面上同時表達流感病毒的表面抗原紅細胞凝集素HA和傳染性囊病病毒的表面抗原VP2蛋白。
7.如權利要求6制備混合病毒樣顆粒的方法,其特征在于,其中所述構建昆蟲桿狀病毒表達載體還含有流感病毒的神經氨酸苷酶NA,其包裝出混合病毒樣顆粒含有流感病毒的神經氨酸苷酶NA。
8.如權利要求6或7制備混合病毒樣顆粒的方法,其特征在于,其中所述構建昆蟲桿狀病毒表達載體還含有流感病毒的核蛋白NP,其包裝出混合病毒樣顆粒含有流感病毒的核蛋白NP。
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