[發(fā)明專利]雜交瘤細(xì)胞株1C11、其產(chǎn)生的抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體及其應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201010245095.5 | 申請(qǐng)日: | 2010-08-05 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN101993855A | 公開(kāi)(公告)日: | 2011-03-30 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 李培武;李鑫;張道宏;張奇;張文;丁小霞;姜俊;陳小媚 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所 |
| 主分類號(hào): | C12N5/20 | 分類號(hào): | C12N5/20;C07K16/14;G01N33/577;C12R1/91 |
| 代理公司: | 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102 | 代理人: | 胡建平 |
| 地址: | 430062 湖*** | 國(guó)省代碼: | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 雜交瘤 細(xì)胞株 c11 產(chǎn)生 黃曲霉 毒素 通用 單克隆抗體 及其 應(yīng)用 | ||
1.雜交瘤細(xì)胞株1C11,其特征在于:它保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏編號(hào)為CCTCC?NO.C201013。
2.抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體,其特征在于:它由保藏編號(hào)為CCTCC?NO.C201013的雜交瘤細(xì)胞株1C11分泌產(chǎn)生。
3.權(quán)利要求2所述的抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體在黃曲霉毒素總量測(cè)定中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求1所述的雜交瘤細(xì)胞株1C11的制備方法,其特征在于:將BALB/c小鼠經(jīng)黃曲霉毒素完全抗原AFB1-BSA免疫4-6次后,用2倍于前一次免疫劑量的黃曲霉毒素完全抗原AFB1-BSA作最后一次加強(qiáng)免疫,3天后進(jìn)行細(xì)胞融合,采用ELISA方法分兩步進(jìn)行篩選融合細(xì)胞:第一步采用間接ELISA法篩選出抗黃曲霉毒素而不抗載體蛋白BSA的陽(yáng)性孔;第二步采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法對(duì)第一步篩選出的陽(yáng)性孔培養(yǎng)液進(jìn)行檢測(cè),用黃曲霉毒素B1,B2,G1和G2共4種作為競(jìng)爭(zhēng)原,選擇吸光值和靈敏度均較高的孔,采用有限稀釋法進(jìn)行克隆,克隆后10天左右采用同樣的兩步篩選法進(jìn)行檢測(cè),如此重復(fù)克隆2-3次后,最終篩選獲得雜交瘤細(xì)胞株1C11。
5.權(quán)利要求2所述的抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體的制備方法,其特征在于:將獲得的雜交瘤細(xì)胞株1C11注射預(yù)先用福氏不完全佐劑處理過(guò)的BALB/c小鼠,收集含有抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體的小鼠腹水,純化即得抗黃曲霉毒素通用單克隆抗體。
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