[發明專利]一種腸球菌屬多重PCR檢測引物及方法

無效

• 申請號: 201010240001.5
• 申請日: 2010-07-29
• 公開（公告）號: CN101880728A
• 公開（公告）日: 2010-11-10
• 發明（設計）人: 王亞賓;胡慧;孟振北;段志剛;陳麗穎;胡清林;耿鑫
• 申請（專利權）人: 河南農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/10;C12N15/11
• 代理公司: 鄭州中原專利事務所有限公司 41109
• 代理人: 張紹琳

1.一種腸球菌屬多重PCR檢測引物，其特征在于：它的序列如下：

腸球菌屬引物的序列如下：

上游引物E1：5′-GTGTCGCTGATGGATGG-3′；

下游引物E2：5′-GCAAGCCGAACTGAGAGA-3′；

糞腸球菌種引物的序列如下：

上游引物FL1：5′-ACATATGTGAATAACTTAACC-3′；

下游引物FL2：5′-TATTGGTGACTCTTGGTTTGG-3′；

屎腸球菌種引物的序列如下：

上游引物FM1：5′-GATAATACAATAGAAGAATTAT-3′；

下游引物FM2：5′-AGCTTTTTTGATATTCTTCTTTA-3′。

2.利用權利要求書1所述的腸球菌屬多重PCR檢測引物檢測腸球菌屬的方法，包括提取樣品的DNA后，用PCR反應體系和PCR反應程序對樣品進行檢測，其特征在于：

所述PCR反應體系，在25μl體系中加入以下成份：

2×PCR?TaqMix?????????8μl

E1/FL1/FM1????????????3μl

E1/FL2/FM2????????????3μl

模板DNA???????????????2μl

dd?H₂O????????????????9μl

???????????????????????????????

總體積????????????????25μl

所述PCR反應程序為：

95℃預變性5min；進入循環，94℃變性30s，49℃退火1min，72℃延伸1min?10s，30個循環；72℃終止10min。