[發明專利]一種豬瘟兔化弱毒活疫苗效力檢驗方法有效
| 申請號： | 201010237929.8 | 申請日： | 2010-07-28 |
| 公開（公告）號： | CN101915837A | 公開（公告）日： | 2010-12-15 |
| 發明（設計）人： | 戴志紅;王在時;關孚時;蔣卉;李翠;陸連壽;溫芳;趙耘;秦玉明 | 申請（專利權）人： | 中國獸醫藥品監察所 |
| 主分類號： | G01N33/569 | 分類號： | G01N33/569;C12Q1/70;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京君智知識產權代理事務所 11305 | 代理人： | 鄭明 |
| 地址： | 100081 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 豬瘟 兔化弱毒活 疫苗 效力 檢驗 方法 | ||
1.一種豬瘟兔化弱毒活疫苗病毒效價的測定方法，其特征在于包括以下步驟：
(1)選擇細胞系用于測定疫苗的病毒效價；
(2)細胞的傳代與培養：將上述細胞消化并用培養液制成細胞懸液，接種24孔組織培養板，在CO2培養箱中培養成單層細胞；
(3)將疫苗10倍系列稀釋后接種至細胞培養板，同時設立陰性、陽性對照；
(4)病毒吸附后加入維持液在CO2培養箱中靜置培養3天；
(5)培養結束時，用固定液固定細胞；
(6)用標記的豬瘟特異性抗體進行免疫染色；
(7)觀察結果，計算病毒效價(TCID50/0.1ml)。
2.根據權利要求1所述的一種豬瘟兔化弱毒活疫苗病毒效價的測定方法，其特征在于用于測定疫苗病毒效價的細胞系為豬腎細胞、豬睪丸細胞、牛腎細胞、牛睪丸細胞和兔腎細胞中的任一種細胞。
3.根據權利要求1所述的一種豬瘟兔化弱毒活疫苗病毒效價的測定方法，其特征在于所涉及的豬瘟特異性抗體為熒光或酶標記的豬瘟單克隆抗體、熒光或酶標記的豬瘟多克隆抗體，熒光或酶標記的第二抗體與豬瘟單克隆抗體或多克隆抗體聯用，以上豬瘟多克隆抗體為豬源或兔源。
4.根據權利要求1所述的一種豬瘟兔化弱毒活疫苗病毒效價的測定方法，其特征在于通過病毒效價TCID50/0.1ml計算豬瘟兔化弱毒活疫苗兔體感染量RID或豬體半數保護量PD50并判斷疫苗效力檢驗是否合格的方法：
(1)15個TCID50相當于1?RID和/或0.25?PD50；
(2)根據測出的病毒效價以及疫苗標明的頭份和稀釋情況計算出每頭份疫苗的RID和/或PD50；
(3)根據計算出的每頭份疫苗的RID和/或PD50，判斷該疫苗效力檢驗是否合格。
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